超临界CO_2萃取-反相高效液相色谱测定海南对虾壳中虾青素的含量.pdfVIP

第2 期 海 南 大 学 学 报 自然 科 学 版 vcJJ．29 NO．1 年 JJ NATURAL SCIENCE JOURNAL OF HAINAN UNIVERSITY Mar．2OI1 2011 3 l 文章编号 ：1004—1729(2011)01—0029—04 超临界 C02萃取 一反相高效液相色谱测定 海南对虾壳中虾青素的含量 周雪晴，冯玉红，谢艳丽，赵振东 (海南大学 分析测试中心 ，海南 海 口570228) 摘 要：采川超临界CO 苇取技术，研究了从海南对虾壳I1]提取虾青素的_r岂，同时采川正交实验 法研究 了其最优化苹取条什，结果表明：_葶取压力为35MPa，蒂取温度为60℃，夹带剂为 100g样品用 l5mL二氯 甲烷，蒂圾filf问为 2h．最后川高效液相色谱法对萃取产物 叶1的虾青素进行 了测定，色谱柱：watersnovapak CI83．9Xl50mm不锈钢柱 ；流动相为 V(甲醇)：V(二氯 烷)：V(水)：50：2：3；流速 ：0．6mL ·rain ；波 K：478nHI；线性}II==!¨爿10～100mg·L ，相关系数0．9992；同收率为99．0l％． 关键词：超临界CO，苇取 ；正交试验；虾青素；HPLC 中图分类号：Q658 文献标志码 ：A 虾青素 (Astaxanthin)¨I2是一种天然非维生素 A源的类胡萝 卜素 ，它广泛存在于虾 、蟹 、鱼巾，具有抑 制肿瘤 、抗氧化 、抗癌变 、增强免疫功能等多方面的生理作用 ，可川作抗癌变的预防治疗剂 、抗衰老剂 、食 品着色剂等等 ，是一种具有很大发展前途的生物T程产品，大『1而它在食品添加剂、水产养殖、化妆品、保 健品和医药T业方面有着广 阔的应用前景 ． 虾青素的提取方法很多，如乙醇提取 、丙酮提取、二氯甲烷提取等，但这些方法存在有机溶剂残留的 现象，会对人体造成伤害．超临界CO：流体提取法操作简便，无环境污染，提取效果较好，无有机溶剂残留， 闪而在天然产物的提取方而倍受青睐 ．冈此 ，本研究以虾青素含量作为试验指标 ，采用正交实验设计 方法，并利用超临界CO：流体萃取工艺对海南对虾壳中的虾青素进行了提取． 1 实验部分 1．1 仪器 Spe．edSFE型超临界流体萃取仪 (美 国AppliedSeparations公司)；Waters2695高效液相色谱 仪，2487紫外检测器 (美 同waters公司)；SB5200DT超声波振荡器 (宁波新芝生物科技股份有限公司)； AL204一IC电子天平 (梅特勒 一托利多仪器有限公司)． 1．2 材料 海南对虾壳(已脱钙 ，采 白海南)；液体 CO (海 口曙光，纯度 99．99％)；虾青素标准品(Sigma 公司)；色谱纯甲醇(Fisher)；二氯甲烷 (为广州化学试剂厂分析纯试剂)． 1．3 方法 ． 1．3．1 超临界CO：萃取 选取对超临界流体萃取效率有较大影响的4个因素：萃取温度、萃取压力、夹 带剂用量、萃取时间，用正交实验进行优化考察，各因素各取 3个水平 ，按表 1进行试验． 收稿 日期 ：2011一ll一0l 基金项 目：海南大学青年基金项 日(qnjjlO03) 作者简介：周雩晴(1982一)，女 ，四川广安人，海南大学材料与化一T学院分析测试中心，讲师 通信作者：冯玉红，海南大学材料与化1-学院分析测试中心，教授． 海 南 大 学 学 报 自然 科 学 版 2011年 表 1 正交实验因素水平 称取粉碎后的海南对虾壳粉末 200g，装入萃取釜中，在一定温度和压力下进行超临界CO 提取，二 氯甲烷为夹带剂，萃取完毕后，收集萃取物，备用． 1．3．2 虾青素测定方法 1．3．2．1 色谱条件 美国waters液相色谱仪；色谱柱：watersnovapakC183．9×150mm不锈钢柱；流动 相为 (甲醇