hDaxx及其删除突变体在原核细胞中的表达与鉴定①.pdfVIP

第 29 卷第 5 期 南华大学学报·医学版 2001 年 10 月 ( ) Vol. 29 No. 5 Journal of Nanhua University Medical Edition Oct. 2001 　 hDaxx 及其删除突变体在原核细胞中的表达与鉴定① 万艳平 ,尹卫国 ,余敏君 ,粟盛梅 ,杨长胜 ,吴移谋 (南华大学 基础医学院 微生物学教研室 ,湖南 衡阳 421001) ( ) ( ) 摘　要 : 目的 　将人Daxx human Daxx ,hDaxx 及其 6 种删除突变体 △hDaxx 在原核细胞大肠杆菌 BL21 ( E. coli) 中表达 , 以便在体外探索hDaxx 的生物学活性。方法 　用 PCR 方法从 Hela 细胞 cDNAs 文库中扩增 全序列 hDaxx cDNA ,利用载体 pQE3x 构建了 hDaxx 及其 △hDaxx 质粒 ,通过异丙基 - β- D - 硫代半乳糖苷 ( ) IPTG 诱导 E. coli 表达相应蛋白质 ,并将其纯化。结果 　IPTG 能诱导 hDaxx 及其 △hDaxx 在 E. coli 中表达 , 表达产物纯化率达 85 %以上。结论 　hDaxx 及其 6 种 △hDaxx 能在 E. coli 中表达。 关键词 :hDaxx ; 　hDaxx 删除突变体 ; 　原核细胞 ; 　表达 ( ) 中图分类号:Q786 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :1000 - 2510 2001 05 - 0435 - 04 Expression and Identification of hDaxx and Its Deletion Mutants in Prokaryotic Cells WAN Yan - ping , YIN Wei - guo ,YU Min - jun , et al ( Department of microbiology , School of Basic Medicine , Nanhua University , Hengyang , Hunan 421001 , China) ( ) Abstract 　Objective :To question the biological activities of human Daxx hDaxx in vitro ,hDaxx and its 6 deletion ( ) mutants △hDaxx were induced expression in prokaryotic cells ,E. coli BL21. Methods : The prokaryotic expression plas mids of hDaxx and △hDaxx were constructed in pQE3x. Expression of hDaxx a