Egr-1特异脱氧核酶对大鼠血管平滑肌细胞纤维连接蛋白表达影响.pdfVIP

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2017-09-02 发布于安徽
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Egr-1特异脱氧核酶对大鼠血管平滑肌细胞纤维连接蛋白表达影响.pdf

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中国医科大学硕士学位论文 Egr-1特异脱氧核酶对大鼠血管平滑肌细胞纤维连接蛋白表达的影响姓名：关丽丽申请学位级别：硕士专业：心血管内科指导教师：刘闺男 ·中文论著摘要· Egr-1特异脱氧核酶对大鼠血管平滑肌细胞纤维连接蛋白表达的影响目的 smoothmuscle 通过对大鼠血管平滑肌细胞(vascular cell，VSMC)转染早期生 respollse 长反应因子．1(earlygrowth (DNAenzyme／10．23 FN表达的影响。白(Fibronectin，FN)表达的变化，研究ED5对大鼠VSMC 实验方法 1、培养大鼠A10主动脉VSMC bovine 用含10％胎牛血清(fetal 5％C02的培养箱中培养。用0．25％胰酶消化、传代。 2、分组稳定转染细胞株瞬时转染ED5。 3、稳定转染Egr．1 书建议的操作步骤进行。细胞转染24h后，将细胞转入直径10cm的培养板中并孔板中并扩增。 4、ED5的合成设计合成针对Egr-1基因起始密码AUG的ED5，D5碱基序列为：寡核苷酸识别序列，中间为保守的催化活性区，在其3’端和5’端各有两个磷酸二酯键进行硫代硫酸修饰，以增加其稳定性。 5、ED5的转染当培养的稳定高表达Egr一1的VSMC生长至70％汇合时，更换无血清无抗生素 FBS无抗生素的DMEM进行二次转染。 6、实验检测方法胞化学法检测Egr．1和FN蛋白表达的变化。实验结果意义pO．05)。 Egr-1和FN蛋白的表达明显降低。结论殖、迁移。关键词早期生长反应因子．1；脱氧核酶；纤维连接蛋白；血管平滑肌细胞；增殖；迁移 2 ·英文论著摘要· Effectsof Oilthe DNAenzymetargetingEg--lmRNA 。 resslonOIofFibrqibronectinmectinratratVNI．● ：pression ob usethe the earlygrowth DNAenzymetargeting respon∞．ifactor-1(Egr-1)and the transfectratvasc