Corilagin抑制照射后BV-2细胞炎症因子表达的体外的研究。pdf.pdfVIP

Corilagin抑制照射后BV-2细胞炎症因子表达的体外研究 华中科技大学同济医学院附属协和医院肿瘤中心 硕士研究生：罗 鸣 导 师：伍 钢 教授 中文摘要 【目的】研究抗炎药物Corilagin抑制放射引起小胶质细胞（BV-2) 炎症反应 的作用及其防护的分子机制。 【方法】 细胞抑制实验（MTT ）检测Corilagin对BV-2细胞抑制率；Corilagin 预处理小胶质细胞，12 h后以0和32Gy 2个放射剂量照射BV-2细胞，Real-time PCR检测小胶质细胞照射后不同时间点炎症因子IL-1β、TNF-α表达水平；硝 酸还原酶法检测细胞上清液中一氧化氮（NO ）的含量；Western-blot检测各 组细胞核转录因子NF-κB p65 蛋白表达；激光共聚焦显微镜观察各组细胞标 志物Iba-1 的表达、NF-κB p65核转位及Nemo 的表达。 【结果】 1~10μg/mL浓度范围内Corilagin对BV-2细胞增殖几乎无影响；照 射后小胶质细胞表面标志物Iba-1表达明显，提示小胶质细胞激活，且炎症因 子NO 、TNF-α、IL-1β表达上调，而Corilagin （5μg/mL)可以显著抑制上述炎 症因子的表达（tIL-1β=6.341 ，P0.001 ；tTNF-α=3.411 ，P0.007 ；tNO=3.134 ， P0.015) ；照射后BV-2细胞内核转录因子NF-κB p65从胞浆转入胞核，免疫细 胞化学进一步提示照射后细胞内活化蛋白Nemo表达增加，而IκB 表达减少。 Corilagin可抑制NF-κB活化蛋白Nemo ，并显著抑制NF-κB p65 的转位。 【结论】 Corilagin可能通过抑制途径照射后小胶质细胞NF-κB信号转导的 活化，从而下调炎症因子表达，保护神经元。 【关键词】Corilagin ；小胶质细胞；NF-κB ；放射性脑损伤 4 The inhibitory effects of Corilagin on irradiated microglia BV-2 cells inflammatory response in vitro Department of Cancer Center of the Union Hospital Affiliated TongJi Medical College, Huazhong University of Science and Technology Master Candidate Ming Luo Supervisor Prof. Gang Wu Abstract 【Objective 】 The aim of this work was to explore the inhibitory effects of Corilagin on the production of pro-inflammatory cytokines in microglia stimulated by radiation. 【Methods 】The cytotoxicity of Corilagin was measured by MTT assay. Microglia BV-2 cells were stimulated by radiation(0, 32Gy)after pretreated with Corilagin for 12 hours. Realtime-PCR was used to detect the inflammatory cytokines such as IL-1β, TNF-α which were exp