大鼠恐惧应激模型的建立与评价指标筛选.pdfVIP

大鼠恐惧应激模型的建立与评价指标筛选 摘 要 目的：建立条件恐惧应激模型，对条件恐惧应激条件下大鼠应激反应和脑损伤相关指 标进行综合的检测、分析、评价，筛选出抗恐惧药物药效的评价指标，以期为抗恐惧 药物药效评价指标体系的建立提供资料。 方法：64只健康雄性 Wistar 大鼠随机分为恐惧应激组及对照组，每组32只。自由摄 食饮水饲养 10 天后，第 11 天起恐惧模型组每日给予 2s 噪音+3s 足底电流刺激，电 流强度为1mA，间隔1min，共30次；对照组每日只给予2s噪音，无足底电流刺激， 间隔1min，共30次。第14天摄像记录两组大鼠5min噪音之后6∼30min内行为变化， 评定模型是否建立。自模型建立后分别于第1、2、3、4周每周周中（第18、25、32、 39 天）对两组大鼠进行一般状态、应激行为反应（冻结时间、 自发活动等）和生理 反应（血清皮质酮 COR ）以及脑损伤（神经元烯醇化酶 NSE 、海马形态学）的观察 和测定。 结果：1. 恐惧模型组大鼠的冻结行为学得分显著高于空白对照组（P 0.01 ），表明建 立条件恐惧应激模型有效。2. 恐惧模型组大鼠同对照组相比，在 4 周各不同时间段 内均表现出神态疲倦、毛发蓬乱无光泽、饮食量减少、大便稀溏现象；两组大鼠体重 均呈增长态势，恐惧模型组体重增长较对照组缓慢，第 2 周（P 0.05 ）、第 3 周（P 0.05 ）、第4周（P 0.01 ）两组大鼠体重比较均差异显著。3. 恐惧模型组大鼠同对 照组相比，在 4 周各不同时间段内均表现出易激惹、厮打行为多、活动减少、扎堆懒 散等现象；两组大鼠自发活动比较，恐惧模型组休息时间在第 1 周（P 0.05 ）、第2 周（P 0.01 ）、第 3 周（P 0.05 ）、第4 周（P 0.05 ）均显著多于对照组。4. 两组大 鼠血清皮质酮含量比较，恐惧模型组血清皮质酮浓度在第 1 周（P 0.05 ）、第2 周（P 0.01 ）、第 3 周（P 0.05 ）、第4 周（P 0.05 ）均显著高于对照组。5. 两组大鼠血清 NSE 含量比较，恐惧模型组血清 NSE 浓度在第 1 周（P 0.05 ）显著高于对照组，其 余各周均无统计学差异；对大鼠海马部位切片进行 HE 染色，结果显示对照组大鼠海 马 CA1 及 CA3 区锥体细胞与齿状回（DG）颗粒细胞的形态正常，细胞排列整齐、 层次紧密，细胞完整，边缘清晰，核仁清晰可见；恐惧应激组大鼠应激第 1 周、第 2 周海马 CA1、CA3 区、齿状回（DG）细胞体积肿胀、细胞淡染、细胞排列稍显稀疏， 第 3 周细胞萎缩，细胞间隙增大，细胞层次变稀、中断，第 4 周，细胞形态不规则， 细胞数量减少，排列疏松不齐，大量细胞坏死，出现细胞核固缩、破裂等现象。 - 1 - 第二军医大学硕士论文 结论： 本研究结果表明，经过改良的 Takeuchi 法可以建立条件恐惧应激模型，条件 恐惧应激可引起大鼠急、慢性恐惧应激，影响大鼠的生理反应和行为反应，并引起大 鼠脑损伤。研究结果可为恐惧对应激反应的影响及脑损伤效应提供依据，为抗恐惧药 物药效评价指标体系的建立提供资料。 关键词：大鼠，恐惧应激，应激反应，冻结时间，皮质酮，脑功能，神经元烯醇化酶， 海马 - 2 - 大鼠恐惧应激模型的建立与评价指标筛选 Abstract Objective: After establishing conditioned fear stress model, the indicato