一珠腈水合酶产生菌发酵过程的控制及其酶学性质的研究.pdfVIP

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2017-09-02 发布于安徽
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一珠腈水合酶产生菌发酵过程的控制及其酶学性质的研究.pdf

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摘要来源于微生物的腈水合酶(Nitrile AN)转化为AM的反应，条件温和、产率高、副产物少。随着AM的需求量不断增大，在NHaSe产生菌方面的研究已成为一个热点，国内外的学者在NHase 产生菌的分离筛选、发酵条件优化和酶学性质等方面做了大量工作，并取得了可喜的成果。本实验通过摇瓶发酵条件的优化，初步确定了]ⅢrIase摇瓶培养的最佳条件。结果表明：当培养基初始pH为7．5，葡萄糖浓度为209／L，尿素浓度为79／L，谷得到的NHase酶活达到967．14U／nlL。对诺卡氏菌(Nocardia sp．)发酵产NHase过程中菌体生长、pH变化以及葡萄糖消耗对NHase合成的影响进行了分析。根据NHase在发酵过程中的合成特性优化了在2L发酵罐中Nocardia sp．产高酶活SHase的发酵工艺条件。结果表明，在分批补糖工艺中，控制发酵液pH为6．5，使发酵液的葡萄糖浓度维持在对菌体进行超声波破壁过程中，初步探索到了最优的破壁条件为超声功率值。利用硫酸铵沉淀技术，对从Nocardia sp．中提取出的Nna．se进行初步分离纯化。在经过硫酸铵沉淀后，酶的纯化倍数到达1．25倍，酶活收率达到48．1％。经过初步纯化后的酶液最适反应pH为7．0，最适反应温度为30℃。关键词：腈水合酶；诺卡氏菌；补料分批发酵；分离 Abstract The the nitrile Microbial，which hydratase(NHase，EC4．2．1．84)fromcatalyzes ofnitrilesto an intheindustrial amides．is importantbiological hydration catalyst of has asmildreaction acrylamide(AM)．Itmanyadvantages．Such production the demandfor conditions，hi曲yields，fewerby-products．Withgrowing AM， Chineseand sehloarshavea researchinNHase foreign widely producingstrain．They did studiesinthemicrobialstrain offermentation many screen,optimization conditionsand achievesfavourableresults． enzymaticproperties，SO The conditionsinthe flasksWasdetermined．Underthe optimization shaking conditionofinitial concentrationWas concentration