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酪氨酸激酶抑制剂BIBF 1120逆转P—gp介导肝癌 HepG2／adr细胞株多药耐药的实验研究 中文摘要 【目的】 多药耐药是阻碍肝癌化疗效果的主要屏障，其产生的重要原因是肿瘤细胞 P．gp高表达。本研究检测了多靶点酪氨酸激酶抑制剂BIBF1120逆转P—gp介导 的多药耐药并对其机理进行探讨。 【方法】 以人肝癌细胞株H印G2和它的P-gp高表达多药耐药细胞株H印G2／adr为 模型；MTT法检测细胞毒效应；阿霉素，罗丹明123积累以流式细胞仪测定； 蛋白表达测定用Westem 定；化学发光法测定BIBF 1120对P-gpATPase活性的影响。 【结果】 BIBF 1120可浓度依赖性增加HepG2／adr细胞株对阿霉素和紫杉醇的敏 感性，0．75，1．5和3肛mo儿的BIBF1120可以使H印G2／adr细胞株对阿霉素 的敏感性分别增加2．18、3．87和7．32倍，对紫杉醇的敏感性分别增加2．56、 4．46和7．89倍。而对相应敏感细胞株H印G2则无影响，也不改变非P·gp 1120使阿霉素的荧光 底物顺铂的细胞毒作用。0．75，1．5和3“mo儿的BIBF 分别增加了3．12、4．23和5．78倍，而阿霉素和罗丹明在相应敏感细胞H印G2 中的积累未受影响。说明BIBF1120可影响药物外排泵功能恢复P．gp介导 的肝癌MDR细胞对传统化疗药物的敏感性。 BIBF 1120 1120对下游ERK和AKT磷酸化水平的抑制常作为评价BmF 1120在有 药效的指标。我们的结果表明在H印G2和H印G2／adr细胞中BIBF 1120 效逆转浓度下对舭和Erkl／2的磷酸化水平没有明显阻断作用，表明BIBF 1120对 恢复P．gp高表达肝癌MDR细胞对化疗药物的敏感性不依赖于BIBF ERK和AKT磷酸化的阻断作用。 Westem l blot和RT．PCR结果表明逆转浓度的BIBF 120不影响P．gp在蛋 ATP酶活性的分析显示BIBF1120可以浓度 白和mRNA水平上的表达。P．gp 依赖性的抑制维拉帕米刺激的ATP酶激活。我们的结果说明BIBF1120是通过 。 抑制P·gp药物外排泵的功能而逆转P-gp介导MDR细胞对其底物的敏感性。 【结论】 BIBF 1120通过直接抑制转运泵功能逆转P-gp介导的多药耐药，逆转活性 与它的酪氨酸激酶抑制功能无关。 【关键词】 1120 多药耐药；P．糖蛋白；肝癌；逆转；酪氨酸激酶抑制剂；BIBF 2 11 Effect l【inaseinhibitorBIBF20onreversal of坶rosine in