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分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量 （湖北中医药大学药学院 药学（2）班 ） 一、实验综述 摘要：以邻二氮菲为显色剂用分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量。研究表明，在pH=2～9的溶液中，铁（Ⅲ）可用盐酸羟胺还原至铁（Ⅱ），生成的铁（Ⅱ）与邻二氮菲生成稳定的橘红色络合物，，其最大吸收波长为506nm,铁浓度在0.31~16.00mg/L范围内与溶液吸收光度呈良好的线性关系，线性回归方程为A= ________________________ 相关系数r=______，检出限为_______ mg/L，相对标准差RSD=_____，表观摩尔吸收系数= ___________L（mol-1cm-1） 关键词：邻二氮菲；分光光度法；铁 铁元素是人体内重要的元素之一。人体缺铁容易导致一些贫血症状甚至一些疾病，所以适当补铁对人体健康有着非常重要的意义。如果人体缺铁，可影响血红蛋白、肌红蛋白的合成，使某些酶的活性降低，引起人体生理上的变化，从而导致免疫力降低，智力降低和机体抵抗力下降等引起的各种疾病的产生。测定新血宝胶囊中的铁含量对于人体的健康有着十分重要的意义。测定铁的含量由很多方法。本文采用邻二氮菲分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量，该法具有操作简单、灵敏度高等特点，结果令人满意。 实验目的 1.了解分光光度法侧铁的选择 2.熟悉显色反应条件与测量条件的选择方法 3.熟悉实验设计的基本内容与方法 4.掌握分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量 实验原理 亚铁离子与邻二氮菲反应生成橘红色络合物，其反应式为： 四、实验仪器和试剂 仪器： 721(722)分光光度计、50ml容量瓶、刻度吸管（1ml、5ml），pH精密试纸。 实验试剂：铁标准储备液(Fe2+=100.0 μg/ml). 0.15%邻二氮菲水溶液(显色剂). 10%盐酸羟胺溶液(还原剂) 醋酸缓冲溶液. 3mol/ml HCl. 1mol/ml NaOH. 五、实验设计方案 （一）测定波长的选择： 在50m L容量瓶中，准确加入0．40m L 铁标准溶液( I ) ，分别加入1 m L 10 ％盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2m i n后，再加入2m L 0．15％邻二氮菲溶液、5 m L1．0m o l ／L醋钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。用l c m 吸收池，以去离子水为空白溶液作参比溶液，在不同波长( 从440一560nm ) 下测定一次吸光度。绘制吸收曲线。 表1 λ/nm 440 450 460 470 480 490 492 494 A λ/nm 496 498 500 502 504 506 508 510 A λ/nm 520 530 540 550 560 A 绘制A—λ曲线 A λ/nm 图1 由图1可以看出，随着波长的增加，吸光度值逐渐增加，在____nm处有最大吸收，此后随着波长的增加，吸光度值降低。因此选择_____nm为最佳吸收波长。 （二）邻二氮菲的用量对吸光度的影响 取6个50 m L 容量瓶，各加1 0- 3m ol ／L 标准铁溶液2 m L 及1 m L 10％N H 20H ·H C I 溶液，摇匀，放置2m i n后，再分别加入0．10 m L、0 ．30 m L、0 ．50 m L、1．0 m L、2 ．0 m L 及4 ．0 m LO ．15％邻二氮菲溶液，和5 m L l m ol ／L C H 3C O O N a 溶液，以去离子水稀释至标线，摇匀。在722型分光光度计上用l c m 吸收池，在选定的波长_____nm ，测定溶液的吸光度( A ) 。绘制吸光度一显色剂用量曲线。 表2 邻二氮菲用量的不同对吸光度的影响 V邻二氮菲 0.10 0.30 0.50 1.0 2.0 4.0 A 根据实验数据绘制A—V曲线 A λ/nm