实验四水果抗氧化活性的研究.docVIP

实验四 水果抗氧化活性的研究 一、实验目的： 通过用分光光度法测定常见水果所含有的抗氧化性物质的量并作比较，寻找当中有助于抗衰老的水果种类，为大众通过食用水果抗衰老提供参考。KMnO4具有强氧化性，能与还原性（即抗氧化性）物质反应，KMnO4反应。通过KMnO4与各种0.10mL水果汁反应后吸光度A1， KMnO4标准溶液稀释至50mL，后的吸光度A3，后者的吸光度减去前者的吸光度，并将计算得出的吸光度代入线性方程y=a+bx (y为吸光度，x为KMnO4的质量)，求出KMnO4质量的变化值，即得出每0.10mL水果汁液消耗的KMnO4的量m1，消耗KMnO4越多，则代表该水果中所含的抗氧化性物质越多。 去离子水、KMnO4（AR）、Na2C2O4（AR）、H2SO4( mol/L)、纱布。 离心机、分光光度计1mL）、容量瓶（50mL）、锥形瓶（250mL）、量筒（50mL）、洗耳球，滤纸、温度计、棕色酸式滴定管（25mL）、电炉、试镜纸。 四、实验步骤： 1、0.01mol/L KMnO4标准溶液的配制及标定 将g KMnO4置于大烧杯中，水至mL，煮沸约1小时，静置冷却后用漏斗过滤，滤液装入棕色细口瓶中，贴上标签，一周后标定保存备用。准确称取 g基准物质草酸3份，分别置于250mL的锥形瓶中，加约30mL水和3mol/L H2SO4 10mL，慢慢加热到7080℃（锥形瓶口出现水珠，逐份加热），趁热用KMnO4溶液滴定。根据的质量和消耗KMnO4溶液的体积计算KMnO4浓度，并用同样方法滴定其他2份草酸溶液。 2MnO4-+5C2O42-+16H+=2Mn2++10CO2+8H20 2、KMnO4溶液最大吸收波长的确定 将已浓度的KMnO4溶液放进分光光度计中，以蒸馏水作参比，从波长为400nm到nm，测定KMnO4溶液的吸光度。KMnO4溶液标准曲线测定 取个容量瓶并标号1，容量瓶准确加入KMnO4标准溶液，然后用蒸馏水定容后摇匀，静置。以蒸馏水为，KMnO4溶液测定各浓度KMnO4的吸光度KMnO4标准溶液 4、水果样品抗氧化性测定 将所有水果样品用自来水、蒸馏水反复冲洗干净后，用20mL，并用4000 rpm 离心机离心5 min后取上清液，备用。用液管取0.2mL水果汁液和0.8mL KMnO4标准溶液于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容。用液管取0.mL水果汁液于容量瓶中，并用蒸馏水定容，用分光光度计测定水果汁液样品中反应后KMnO4的A1,平均测三次。最后，用0.4mL KMnO4标准溶液稀释至50mL的吸光度A3减去水果汁液样品中反应后KMnO4的A1以及背景值，得出的吸光度用线性方程算出水果样品消耗的KMnO4量m1。 1、KMnO4标准溶液的标定 样品号 1 2 3 m（Na2C2O4）（g） KMnO4终读数（m） KMnO4初读数（m） VKMnO4(mL) CKMnO4(mol/L) CKMnO4(mol/L)平均值 绝对偏差 相对平均偏差（%） 2、KMnO4溶液的最大吸收波长 波长nm 400 410 420 430 440 450 460 470 480 吸光度A 波长nm 490 500 510 520 522 524 526 528 530 吸光度A 波长nm 532 540 550 560 570 580 590 600 610 吸光度A 以吸光度为纵坐标，波长为横坐标绘制曲线： 波长nm 图1 KMnO4溶液的吸收曲线 KMnO4溶液的最大吸收波长为nm。 3、绘制KMnO4的标准曲线 项目 1 2 3 4 5 6 7 8 加入KMnO4的量（mL） 0 0.10 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 吸光度 扣除空白值 KMnO4（mg） 以吸光度为纵坐标，KMnO4的质量为横坐标绘制曲线： 高锰酸钾质量mg 图2 KMnO4溶液的标准曲线 求出的线性回归方程为y=a+bX=______________________ 4、水果抗氧化性 ____________水果的抗氧化性 1 2 3 与KMnO4反应后A1 A1平均值 水果液汁的背景值 0.80mLKMnO4标准溶液稀释至100mL后的吸光度A3 A3-A1-背景值 消耗的m1（KMnO4/mg 注意事项 1、标定KMnO4溶