3第三章色谱分析法1.ppt

色谱分析法(Chromatography) 色谱法分类 1、按固定相及流动相的状态分类 　　 色谱：气液色谱、 气固色谱 液相色谱：液液色谱、液固色谱 ? 2、按固定相形状分类 　　 柱色谱，纸色谱，薄层色谱。 色谱法分类 气相色谱( Gas chromatography ) 填充柱气相色谱（Packed column gas chromatography) 毛细管气相色谱 (Capillary column gas chromatography) 裂解气相色谱(Pyrolysis gas chromatography ) 顶空气相色谱 ( Headspace gas chromatography) 气相质谱联用技术（Gas chromatography-Mass spectrometry) 色谱法分类 平面色谱法（Planar chromatography） 薄层色谱 ( Thin layer chromatography) 薄层电泳色谱 (Thin layer electrophoresis ) 纸色谱( Paper chromatography) 色谱法的特点 与其它分析方法相比，具有的优点： 分离效能高 灵敏度高 分析速度快 应用范围广 缺点：对未知物的定性比较困难 解决方法：与其它分析方法联用（质谱、 红外和电化学等） 分离度 分离度 塔板理论和速率理论都难以描述难分离物质对的实际分离程度。柱效为多大时，相邻两组份能够被完全分离。 难分离物质对的分离度大小受色谱过程中两种因素的综合影响： 保留值之差──色谱过程的热力学因素； 区域宽度──色谱过程的动力学因素。 由此可见，单独用柱效或选择性不能真实反映组分在色谱柱中分离情况，故需引人一个综合性指标——分离度R。分离度是既能反映柱效率又能反映选择性的指标，称总分离效能指标。 分离度的表达式 分离度与基本色谱分离方程式 分离度R的定义并没有反映影响分离度的各种因素。实际上，分离度是受柱效（n）、选择因子(α)和容量因子（k）三个参数的控制。 上式即为基本色谱分离方程式, 也可表示为: 同理, 可得: 也可表示为: 提高分离度的途径(1) 1. 提高柱效 (1)增加柱长: n增加2倍时R只增大1.4倍 (2)降低塔板高度H: 是提高分离度的最好方法 分离度与柱效的关系 当固定相确定，被分离物质对的α确定后，分离度将取决于n。这时，对于一定理论板高的柱子，分离度的平方与柱长成正比，即 为了提高柱效，可采用的途径：（1）采用直径较小、粒度均匀的固定相；（2）控制较薄的液膜厚度；（3)选择适宜的流动相、流速和温度等。 提高分离度的途径(2) 2. 增大容量因子k R 随 k 增大而增大，但是分析时间也随之延长。为了增大k值，可采用的方法：（1）GC: 增加固定液的用量，适当降低柱温；（2）LC: 适当采用极性较小一些的流动相。 提高分离度的途径(3) 3. 增大选择性因子?值 由于?的微小变化，都对R有很大的影响，增大?值是改善分离度的最有力的手段。 为了增大?值，可采用的方法：（1）GC: 适当降低柱温；（2）LC: 通过控制固定相和流动相的性质来调整? 。 存在的问题： ?的变化不像n和k有规律可循。 例题 已知物质A和B在一根30.0 cm长的柱子上的保留时间分别为16.40 min和17.63 min, 不被保留组分通过该柱的时间为1.30 min, 峰底宽度分别为1.11 min和1.21 min，计算： （1）柱的分离度； （2）柱的平均塔板数； （3）塔板高度； （4）完全分离时所需的柱长。 答案 (1) R=1.06; (2) n (A) =3493, n (B) =3397, n 平均 =3445 ; (3) H= L/n = 8.7×10(-3) cm; (4) R1 =1.06, R2 =1.5, L1 =30.0cm, L2 =? L2 = 60.0cm 气相色谱固定相 气固色谱固定相 气固色谱固定相的特点 气液色谱固定相 担体（硅藻土） 硅藻土的显微图象 填充柱气液色谱担体一览表 3．固定液分类方法 固定液分类 几种常见的固定液的相对极性 几类常用固定液 固定液的选择 固定液配比（涂渍量）的选择 仪器种类根据需要很多差别,但均由以下五个系统组成 气路 进样 分离 温度控制 检测和记录 1. 气路 载气 气路 出口 皂膜流量计 平