RP—HPLC法测定黄连及酒黄连中3种生物碱的含量.pdfVIP

JIANGXIJOURNALOFTRADITIONALCHINESEMEDICINE RP—HPLC法测定黄连及酒黄连中3种生物碱的含量 ★ 罗小泉 吴国庆 河海峰’ (1．江西中医学院 南昌330006；2．江西中医学院附属医院 南昌 330006) 摘要：目的：探索高效液相色谱法测定黄连及经过不同酒制方式后黄连中生物碱含量的方法。方法：色谱柱为C，柱 (4．6mln x200脚m，5 m)，流动相为乙腈：O．05moVL磷酸二氢钾(28：72，并用磷酸调pH为3．0)，检测波长为345nm。结论：在此色 谱条件下，小檗碱、巴马亭、和药根碱分离效果好；方法灵敏度高，重现性好。可用于黄连等含小檗碱型生物碱中药材及制剂 的质量控制。 关键词：反相高效液相 色谱法；黄连；酒黄连；生物碱；含量测定 中图分类号：R284．1 文献标识码：B 酒黄连有酒炒、酒蒸、酒煮、酒洗等不同，在 《银 所 。 海精微》、《珍珠囊》、《普济方》、《本草求真》、《得配 黄酒(绍兴县东江有限公司)试验使用 甲醇、乙 本草》等书中有记载。酒制升提，用酒炮制黄连，能 腈为色谱纯，磷酸二氢钾为分析纯，水为重蒸馏水， 使黄连长于上行，清上焦热邪。但 由于酒制方式不 其他试剂均为分析纯。 同，作用也有所区别：(1)酒炒长于清上焦热，如 《医 2 方法与结果 宗粹言》渭：“酒炒去头 目之火。”(2)酒蒸长于治消 2．1 药材的炮制及溶液的制备 渴，如 《本草求真》谓 “治消渴，用酒蒸黄连”。(3) 2．1．1 生黄连 取原药材，去除杂质，润透后切成 酒煮长于治伏暑，本 《本草求真》谓 “治伏暑，用酒煮 片，晾干[21。 黄连”等。此外，酒制黄连还可缓和黄连的苦寒之 2．1．2 酒黄连的炮制 (I)酒炒黄连：取净切片黄 性 。不同酒制方式，功效何以有别，本文对不同 连。酒炙法炒干，每 1kg黄连用黄酒0．125kg[。 酒制方式黄连中3种主要生物碱的含量作了对比研 (2)酒煮黄连 取净制黄连，大小分档，加黄酒适量， 究 。 黄酒淹过药面，煮至酒被吸尽，取出，晾干。(3)酒 1 仪器与试药 蒸黄连 取净制黄连适量，大小分档，置笼屉内，用黄 1．1 仪 器 酒蒸制 1．5小时，取出，晾干。 DionexMltiMate3000液相色谱仪，PDA-3000二 2．1．3 对照品溶液的制备 分别精密称取盐酸小 极管阵列紫外检测，Chromeleon工作站，天平 (瑞士 檗碱、盐酸巴马亭、盐酸药根碱对照品 l3．32、3．1、 METFLER)，Sartorius万分之一电子天平 (德 国赛多 4．99mg，分别置50ml容量瓶 中，加甲醇．盐酸 (100 利斯)，RayngerST型红外测温仪 (美 国Raytek)， ：1)溶解并稀释至刻度，作为标准储备液，分别精密 RE52CS旋转蒸发仪 (上海亚荣生化仪器厂)，SHZ． 吸取标准储备液各 15ml，置同一50ml容量瓶中， D(Ⅲ)循环水式真空泵 (巩义市予华仪器有限责任 稀释至刻度，做为混合对照品溶液。 公司)。 2。1．4 供试品溶液的制备 精密称取生黄连及黄 1．2 试药 连的不同酒制品粉末约 1g(过三号筛)，置于具塞 黄连(购于樟树药材市场，经本院中药鉴定教 锥形瓶中，加甲醇一盐酸(100：1)50ml，称定重量，静 研室刘庆华老师鉴定为毛莨科植物味连 Coptis 置30分钟后，连接冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸 chinensisFranch的干燥根)。 1小时，再超声30分钟，放冷，用混合溶剂补足减失 盐酸小檗碱 (Berberinehydro—chloride)、盐酸巴 的得量，摇匀，备用。 马亭(Palma