白花马蹄莲组织培养脱毒技术研究.pdfVIP

林业科学 现《代农业科技)2009年第 23期 白花马蹄莲组织培养脱毒技术研究 祝泽刚 陈 旭 吴 梅 王 轶 (浙江省金华市农业科学研究院花卉苗木研究所 ，浙江金华 321017) 摘要 以白花马蹄莲感染病毒的芽块为供试材料 ，对组织培养快速繁殖 中的消毒时间、培养基的激素种类与用量等关键技术进行 了 研究，并筛选出最适分化培养基 1／2MS+6一BA1．0mg／L+IBA0．03mg／L+GA0．2mg／L和生根培养基 1／2MS+IBA0．2mg／L，且组织培养脱毒 效果 良好 。 关键词 白花马蹄莲；组织培养；脱毒；最适培养基 中图分类号 $682．264 文献标识码 A 文章编号 1007—5739(2】【09)23一O2O6—01 白花马蹄莲为天南星科的球根花卉 ，马蹄莲属 ，是近年 mg／L+GA0．2mg／L(E)。生根培养基共设 5个处理，分别为： 新兴花卉之一 ，作为鲜切花市场需求较大 ，前景广阔。白花 1／2MS+IAA0，2mg／L(A2)；1／2MS+NAA0．2mg／L(B2)；1／2 马蹄莲叶片翠绿 ，花苞片洁 白硕大 ，宛如马蹄 ，形状奇特 ，是 MS+IBA0．3mg／L(C2)；1／2MS+IBA0．4mg／L(D2)；1／2MS+ 国内外重要的切花花卉 ，用途十分广泛 。但 白花马蹄莲病毒 IBA0．2mg／L(E：)。培养基琼脂浓度 0．7％，蔗糖浓度 2．6％。 病迅速蔓延 。严重威胁马蹄莲产业的健康发展。对马蹄莲病 1．3 移栽 毒病 的防治除拔除病株 、严禁采用带毒种球播种外 ，最根 待试管苗长到 3~6cm时，在温室或培养室中将瓶 口打 本的措施就是大量培育无病毒种球[1叫。利用组织培养进行 开，锻炼 2~3d后 ，用无菌水洗净根部 的培养基 ，移栽至基质 脱毒 ，不但突出了生产的实用性 ，而且可以节省人力物力 ， 为泥炭土与砂壤土各 1／2的塑料盆 中，并用塑料膜盖好 。保 使脱毒工作更加简便有效 。 持室内温度25~C、相对湿度 100％的小环境，每天喷水并通 1 材料与方法 风 1次，3d后可以开 1条小缝以通风 ，以后逐渐扩大直至全 1．1 外植体消毒与接种 部揭开 。每周浇 1次营养液。炼苗 10d后 ，即可移栽入营养 取 白花马蹄莲感染病毒的芽块，将芽块纵切成0．4cm~ 钵 ，置于温室中培养成苗。 0．4cm左右大小 。先用自来水冲洗 10rain，用蒸馏水洗涤 1 1．4 病毒检测 次，在超净工作 台上用 70％酒精浸泡一下，再用 0．1％升汞分 采用PAS-ELDSA检测温室中移栽成活苗带毒状况 ， 别浸泡 3，5，7，9，1lmin，无菌水冲洗 4～5次 ，并以无菌滤 随机抽样 。各取 10份叶片和枝条作为检测材料，并以健康 纸吸干水分 ，将切取 的芽块接种于分化培养基上进行诱导 的指示植物作为阴性对照，试验重复 3次。 分化培养 。3~4个月后转到生根培养基上培养 。培养室的 2 结果与分析 温度控制在 (25+2)℃，并用双管40W 目光灯照射 12h／d。 2．1 消毒时间对培养基污染和茎段褐变的影响 1．2 供试培养基 从表 1可知，O．1％升汞消毒的时间长短不同，其分化培 分化培养基共设 5个处理 ，分别为 ：1／2Ms+6一BA 1．0 养基受污染率和茎段褐变 的比率也不 同。处理时间长 ，培养 mg／L+IBA0．02mg／L+GA0．2mg／L(A1)；1／2MS+6一BA0．8 基受污染率小，但茎段褐变的比率大 ；相反，处理时间短 ，培 mg／L+IBA0．02mg／L+GA0．2mg／L(B1)；1／2MS+6一BA1．0 养基受污染率增大，而茎段褐变的比率变小。用0．1％升汞 mg／L+