金黄色葡萄球菌RAP与TRAP蛋白基因表达及免疫保护作用.pdfVIP

摘要 金黄色葡萄球菌(S．aureus)是一种重要的致病菌，可以引起人和动物的多种疾病，其主要 致病物质是毒素和酶。在S．aze／eus对数生长的中后期，细菌开始分泌RAP，RAP通过作用于膜表 免疫动物能否产生良好免疫保护作用仍不十分清楚。因此，本实验用原核表达的RAP和TRAP分 别免疫小鼠，研究它们的免疫保护作用。 本课题采用PCR方法扩增金黄色葡萄球菌毒力调控蛋白RAP基因和TRAP基因，将这两条 Blot分析，结果证明重组苗表达出 后进行SDS．PAGE电泳，并用抗Histidine单抗进行Western 行纯化，用弗氏佐剂乳化后免疫小鼠，每种蛋白分为10119、2099和50lag三个剂量，同时设生 理盐水对照组。首次免疫后四周进行二次免疫，再过一周对小鼠进行攻毒，并观察13天。结果 和TRAP有较好的免疫原性，可以作为疫苗的抗原应用于临床上防制最12／／．re／／3感染。 关键词：金黄色葡萄球菌，RAP，TRAP，免疫保护 lIl Abstract The onekindof Call bacteria,which staphylococcusQureu$氍aureus)isimportantpathogenic causeclinicalVOWmastitisandotherhumanandanimaldiseases．Toxinsand arethemain enzymes virulencefaeto^ofSaureuswhich RAPandTRAPcall the regulationprotein cooperatelyregulate ofvarioustoxinsand inallinteraction toxinsthenCanactonanimal production erlzyma3 pattern．The cellsand andTRAP all rolein the destroythem．Thus，RAPtogetherplay importantregulating virulenceand ofS．aureus．Whileincurrentresearchdomestic still and is pathogenicity abroad，it unclearwhether RAPand antibodies TRAPcould animalsfromaⅫeusinfectious． against protect aseriesof todemonstratethe ofRAPand Therefore，Weperformed exprdments immunoproteetion TRAP In TRAP this RAPand a／／re／g，were experiment,the genesofstaphylococcussuccessfullyamplified Chain