色谱分析法(一).pptVIP

洗脱色谱不仅能使试样各组分获得良好的分离，色谱峰清晰，同时除去冲洗剂后，可获得纯度较高的物质，是目前使用最广的一种方法。线性洗脱色谱：两相间的浓度呈线性关系非线性洗脱色谱：两相间的浓度不呈线性关系 （1）当试样中各组分在两相的分配系数不同时，就能实现差速迁移，达到分离的目的。（还可根据时间长短进行定性）（2）让足够量的流动相通过色谱柱，就能在柱的末端收集到各组分。（3）如果柱的末端有检测系统，并能以信号大小对时间作图，则可得到呈高斯分布的色谱流出曲线。 §19—3??色谱法基本理论 气液色谱:多用高沸点的有机化合物涂渍在载体上作为固定相，利用分子在两相的分配系数不同分离试样。一般只要在450℃以下有1.56?kPa一10?kPa的蒸气压且热稳定性好的有机及无机物都可用气相色谱法来分离 (3)净化器??净化器是用来提高载气纯度的装置。净化剂主要有活性炭、硅胶和分子筛、105催化剂，它们分别用来除去烃类物质、水分、氧气。 (1)进样器 ?目前液体试样的进样，一般都用微量注射器，常用的规格用1μL、5 μL 、10 μL和50 μL等。???(2)气化室??为了让试样在气化室中瞬间气化而不被分解，因此要求气化室热容量大，无催化效应。为了尽量减小柱前谱峰变宽，气化室的死体积应尽可能小。 微分型检测器:分为浓度型和质量型 浓度型检测器(如热导池、电子捕获检测器)测量的是载气中组分浓度的瞬时变化，即响应信号正比于载气中组分的浓度。 质量型检测器(如氢火焰离子化检测器)的响应值正比于单位时间内组分进入检测器的质量。 影响热导池灵敏度的因素?? 热导池检测器是一种检测柱流出物把热量从电热丝上传走的速率的装置，因此从热丝上带走热量的效率越快，其灵敏度就越高。 影响灵敏度的主要因素有：桥路电流、载气、热敏元件的电阻值及电阻温度系数，池体温度等 电子捕获检测器是一个具有高灵敏度和高选择性的检测器。它经常用来分析痕量的具有电负性元素的组分，如食品、农副产品中的农药残留量，大气、水中的痕量污染物等。 缺点：电子捕获检测器是浓度型检测器，其线性范围较窄(102～104)，因此，在定量分析时应特别注意。 楮头红多糖中单糖组成的气相色谱分析 内标肌醇六乙酸酯的制备 称取3 g肌醇加入4.5 g盐酸羟胺、4.5 mL醋酸酐和3 mL吡啶，在90 ℃水浴中加热2 h并不断搅拌。将反应液冷却至室温倒入50 mL冰水中，使肌醇六乙酸酯析出。过滤后加20 mL水洗涤，将压干后产物放入100 ℃烘箱中烘干备用。 气相分析 色谱柱:中科院兰州化物所OV1701（30.0 m×0.32 μm×0.25 μm）毛细管柱;柱温:205 ℃;检测温度:300 ℃; 程序升温205 ℃维持4 min，以6 ℃每分钟升至240 ℃；汽化温度:280 ℃ 气体流速:N2(载气)25 mL/min,H2 30 mL/min空气400 mL/min分流模式。 SWPⅡ的GC分析结果? 糖样 保留时间(s) SWPⅡ的 面积（％）  保留时间(s) 鼠李糖 9.034 8.976 19.022阿拉伯糖 9.836 木糖 10.271 甘露糖 14.203 葡萄糖 14.734 14.780 29.581半乳糖 15.530 15.442 51.396内标肌醇 18.202  通过比较样品的气相色谱图和标准单糖气相色谱图的保留时间可以看出，SWPⅡ气相色谱图中的鼠李糖、葡萄糖和半乳糖的出峰时间与标准色谱图一致，它们的峰面积比通过面积归一化处理为19.022:29.581:51.396。根据峰面积之比即为质量之比可以计算出鼠李糖、葡萄糖、半乳糖的摩尔比为11.6:16.4:28.6。 思考题 1、从色谱流出曲线上，一般可以得到哪些重要信息？ 2、何谓理论塔板数？其对色谱分离有何影响？影响理论塔板数的主要因素有哪些？ 3、何谓分离度，二色谱峰能有效分离的条件是