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EDTA 二钾对血细胞的影响最小。抗凝血在室温下放置4 ～6h 不影响红细胞体积，是血液细胞分析仪最适合的抗凝剂。操作时将150g／L 的E DTA 二钾水溶液10μl 加入试管内（不必烘干， 便于混匀）， 抽血1．0 ml 混匀即可。血液学标本的前处理（一） 毛细血管采血【器材】一次性无菌三棱针、消毒干棉球、75 ％乙醇棉球、20μl 一次性微量吸管。【操作】（1） 成年人的采血部位以左手无名指为宜，婴幼儿于拇指或足跟两侧采血。（2） 轻轻按摩采血部位使其充血，用75 ％乙醇棉球消毒局部皮肤。（3） 紧捏采血部位，用无菌三棱针穿刺皮肤，动作须迅速，刺入深度以2 ～3 m m 为宜。（4） 擦去第1 滴血，按需要依次用20μl 微量吸管采血， 标本先测血小板，再依次测红细胞、血红蛋白、白细胞、血型等。（5） 采血完毕后用干棉球按压伤口止血。（二） 静脉采血【器材】一次性注射器、3 ％碘酊棉球、75 ％乙醇棉球、止血带、抗凝管（瓶）。【操作】（1） 根据检验目的核对患者姓名、联号、准备的器材。（2） 让患者坐位或卧位伸出手臂，握紧拳头，用止血带扎紧上臂使静脉怒张。（3） 用3 ％碘酊消毒皮肤。（4） 取出一次性注射器，并检查针头连接处是否漏气或松动。（5） 根据血管分布情况，将注射器针头与手臂约成30°角顺利进针至血管内抽血。（6） 抽取检测项目所需血量后松开止血带，用干棉球按住进针口并拔出针头。（7） 抗凝剂与血液严格按要求配比。血液加入试管内应立即摇匀以免凝固。（8） 如果进针或抽血过程不顺利，应换另外静脉重抽，以免血小板聚集或出现微小凝块。三、标本的运输和保存（1） 在室温下E DTA 二钾抗凝的静脉血中白细胞、红细胞、血小板可稳定24h ，白细胞分类结果可稳定6 ～8h ，血红蛋白可稳定数天，但白细胞形态在2h 后可发生变化，需要借助显微镜分类的标本要及时推片固定。标本在4 ℃ 冰箱内贮存的时间可适当延长，但低温对血小板计数和血小板体积两项检测结果影响较大。（2） 使用半自动血细胞分析仪时， 由于大多采用末梢法采血， 标本往往直接稀释，血细胞在高稀释状态下会自溶破坏而影响检测结果，因此标本不宜保留过久，一般要求在1h 内测定完毕。（3） 测定血沉、血细胞比容应在2h 内完成。夏天气温较高， 标本在运输和保存时应加盖盖住，以免标本浓缩。一、血液细胞分析仪的检测原理（一） 白细胞检测原理1．白细胞计数原理（1） 电阻抗法：血细胞是一种不良导体， 将血标本稀释、溶血后制成白细胞悬液后，在负压的作用下，悬液流经一个带有微孔的恒压电路时，每个细胞会产生一个电阻脉冲信号，这些信号经过微机的放大、甄别、整形等处理，最后根据这些信号计算出单位体积内的白细胞数。（2） 光学法：血标本在稀释液和溶血剂的作用下制成一定浓度的白细胞悬液，根据流体力学的鞘流技术原理，使得白细胞一一流经仪器检测器，每个细胞在通过检测器时都会受到一束固定波长的激光照射，微机根据光的折射、反射、前向角等信号来识别和计数细胞。【注意事项】（1） 电阻抗法计数的是“颗粒” 的数量，“颗粒” 毋须有完整的细胞结构，这使某些易溶淋巴细胞（脆性淋巴细胞） 不易漏检。其缺点是：①容易受到有核红细胞、抗溶血红细胞、血小板团块及其他颗粒性物质的干扰。②由于细胞仪的微孔管无法使细胞逐个通过（一般白细胞测试孔径为100μm ， 红细胞／血小板测试孔径为80μm ）， 细胞悬液通过测试孔时往往会出现细胞“重叠” 现象而使检测结果偏低，特别是标本中细胞数超出一定线性范围时。为了排除重叠损失，仪器设有一个补偿系统，可通过下列公式进行计算以自动校正：n″＝p （n′／1000）2 　　补偿后细胞数＝n′＋n″　　p ＝2．5 （d／100）2500／V式中n″为重叠损失数；n′为未加补偿时计数值；p 为补偿系数；d 为小孔直径；V为计数体积。（2） 光学法细胞计数的优点是可以有效排除有核红细胞、抗溶血红细胞、血小板团块、其他颗粒性物质的干扰，其缺点是对易溶淋巴细胞（脆性淋巴细胞） 容易漏检。一些五分类血细胞分析仪同时用两种方法进行计数，当两种方法的结果不符时仪器会提示并根据干扰因素的大小报告一个较为准确的结果。2．白细胞分类原理白细胞分类是血细胞分析仪的重要技术指标，各个公司研制的不同型号的血细胞分析仪对细胞进行分类的技术原理也不一样。（1） 两分群、三分群血细胞分析仪原理：通常两分群、三分群血细胞分析仪均采用单一的电阻法，即在溶血素的作用下，白细胞发生皱缩，仪器根据白细胞颗粒产生的电阻脉冲信号的数量计算出单位容积内白细胞总数；再根据脉冲信号的强弱计算出细胞体积。在体积分析过程中，微机将皱缩的白细胞在35 ～45Ofl 范围内分成256 个通道，每个通道1．64fl 。根据通过不同通道细胞的数量