解读基因工程中的工具酶.pdfVIP

生 堂塾堂三 堡(箜塑鲞2笙 塑 · 6I · 解读基 因工程 中的工具酶 左延柏 (江苏省南京市第三十九中学 210015) 摘 要 本文简要介绍了与中学教学相关的基因工程 “工具酶”概念和种类，并选用相关的例题予以解析。 关键词 基因工程 工具酶 在2008年的江苏省高考生物学科考试说明中“基 源DNA，而对 自身的DNA不起作用，达到保护 自身的 因工程的应用”的考点要求明显高于江苏省 《普通高 目的。只能识别 DNA分子中特定的核苷酸序列，也叫 中课程标准教学要求》中所规定的内容与要求，这就要 做靶序列 ，且只能在每一条链中特定的部位进行切割， 求教师和学生对基因工程应用的知识相当熟悉。本文 这种能被特异性识别的切割部位都具有 回文序列，也 就基因工程 “工具酶”的相关知识作较为详尽的介绍 就是在切割部位，一条链正向读的碱基顺序，与另一条 和例析。 链反向读的顺序完全一致。 1 基因工程的工具酶 (2)切割方式 有错位切 (形成黏性末端)和平 1．1 限制性核酸内切酶 多数来 自原核生物。其作 切(形成平末端)(如图)。其中错位切 ：切下后的两端 用、特点等如下 ： 形成一种回文式的单链末端 (黏性末端)；平切 ：在两 (1)作用及其特点 能识别双链 DNA特定的核 条链的特定序列的相同部位切割，形成一个无黏性末 苷酸序列，并在特定部位切割DNA双链结构，使特定 端的平口(平末端) 部位的两核苷酸之间的磷酸二酯键断开。主要切割外 切点 切点 ． ．． ． ． 1．．．．．．．．．．．，．．．．．．一 f 5，．·…· T下 ……3 5，．…-- Q 平 3，一-…·亡十 干AA；6……5’ 3…．．亡亡6 切 —_I『 I切点 I ／＼ ／ ／ ＼ ＼ G A A T T C …… 3 C C i G‘…… 5’ C T T A A G G 钳位切 (3)意义 将侵入细胞的 “外源”DNA分子切割， 单链 DNA。 使其迅速降解。原核生物容易受到 自然界外源 DNA 2 例题解析 的入侵，这些生物在长期的进化过程中形成了一套完 例 1 限制性内切酶 I的识别序列和切点是 一 善的防御机制，以防止外来病原物的侵害。限制酶就 G GATCC一，限制性 内切酶 Ⅱ的识别序列和切点是 是细菌的一种防御性工具 ，当外源 DNA侵入时，会利 一 GATC，在质粒上有酶 I的一个切点，在 目的基因 用限制酶将外源 DNA切割掉。所 以，限制酶在原核生