2-甲氧雌二醇对HL60白血病细胞凋亡以及bcl-2表达的影响.pdfVIP

柳州 医学 2009年第 22卷第 4期 ·l97· 2一甲氧雌二醇对 HL60白血病细胞凋亡以及 bcl一2表达的影响 蔡应木，张俏忻 ，王雪华，刘元生，吴映娥 ，焦晓阳 (汕头大学医学院第一附属医院检验科，广东 汕头 515041) 【摘 要 】目的 探讨 2一甲氧雌二醇对 HL60白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法 运用 M1丫r法和流式 细胞 术检测 2一甲氧雌 二醇对 HL60 白血病 细胞 的增 殖抑制 及促 凋 亡作 用 ，应 用 流式 细胞技 术检测 Bcl一2 蛋 白的表达 。结果 随着2一ME浓度 的升 高，各项指标与对 照组相 比较 的差异均有统计学意义 (P0．O1)； HI／50细胞 增 殖 明显 受到抑 制 ；细 胞 凋 亡 率 明显增 加 ，且 当 2一ME浓 度 为 50 ol／L时 ，细 胞 凋 亡 率 达 65．8％；30 M2一甲氧雌二醇作用72h后 的细胞 ，bcl一2蛋 白的表达较对照组显著减少。结论 2一甲氧雌二 醇具有对 HL60白血病细胞增殖抑制及促凋亡作用，bcl一2蛋 白表达 下调在此过程 中可能发挥着重要 的作 用 【关键词 】2一甲氧雌二醇 ；HL60白血病细胞 ；bcl一2 【中图分类号 】R286．9l；R965．1 【文献标识码 】A 随着医学 的发展 与进 步 ，急性 白血 病 的治疗水 1，2．1 将 不 同浓 度 (1O、30、50 M)的 2一甲氧雌 平 也有 了很大提 高 ，目前 白血病 的治疗方 法有化疗 、 二醇 分别与 HL60 白血病细胞 于 37℃温育箱 中培养 中西医结合治疗 、骨髓移植 、生物调节剂治疗 、基 因 72h，或 30 M 的 2一甲氧雌 二醇 与 HL60白血病 细 治疗等方面 ，在众 多治疗方法 中，化疗至今仍是治疗 胞于 37℃温 育箱 中分别培养 24、48、72h每个浓度 白血病最 经典和常用的方法 。但 是在初治 白血病 患 组平 行接 种 3孔 ，阴性对 照组不加 药。 者 中 ，约 20％的急性非淋 巴细胞 白血病 和 15％的急 1．2．2 用 四唑盐 (MTT)比色实验法对细胞增殖活 性淋 巴细 胞 白血病 患者经正规 的化疗不 能缓解 。 白 性进行检测 细胞经药物作用后离心 ，去上清 ，每孔 血病复发患者再次达缓解 的几率低于 50％，如何提 加 入 5ml mlM1Yr及 PBSIO0~I，37℃ ，5％CO2，饱 和 高难治性 白血病 患者的缓解率 是提高 白血 病治疗 效 湿度培养 4h后 离心去上清 ，加入 200~1DMSO，用酶 果的关键 ，也是临床 急需解决 的问题 。 联免 疫 检 测 仪 测 定 各 孑L在 570nm 处 的 吸 光 度 2一甲氧雌二醇是体 内 17一p雌二醇 的代谢产 (A570)值 ，按下式计 算细胞抑 制率 物 ，国外 的研 究表 明其在体外实验和肿瘤接种模 型 抑制率 (％)=A对照 一A实验 ／A对照 ×1o0％ 中 已被证 实具有潜 在 的抗 多种 肿瘤 的活性 ，而 国 内 1．2．3 流式细 胞术检测 2一甲氧雌 二醇诱 导 HL60 鲜有关于 此药物 的研究报告 。多种 机制 参 与 2一甲 细 胞 的凋亡 率 氧雌二醇 的抗肿 瘤活性 ，其 中阻止 SOD酶 的活性被 以 10、30、50LLmoL／L浓度 的 2一甲氧雌 二 醇作 认 为是其抗 肿瘤 的主要 机 制。最近 研究表 明 2一甲 用 36h后分别 收集 HL60细胞 按照试剂 盒说 明操 氧雌二醇可以通过 阻止 SOD酶而使细胞 内 02一产 作 ，PBS洗 涤 2次 ，70％冷 乙醇 固定 ，碘化丙锭 (PI) 生堆积 ，进 一步破坏线粒体膜 ，释放细胞色素 c而 染 色 ，应 用 美 国 BeckmanCoultm ‘公 司生 产 Epics— 激 活凋亡级 联反 应 。而 且这 种 作用 在 肿瘤