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病理生理学实习指导
一、缺氧模型的实验性复制
㈠目的与原理
通过给动物低氧环境,影响Hb的带氧能力及使组织不能利用氧等方法,复制不同类型缺氧模型,经呼吸、机能状态、皮肤粘膜颜色等指标,显示了其不同症状与特征,同时对复制模型的方法及原理又有大概的了解,有利于深入和研究各缺氧症的发生、发展和转归的规律。
㈡实验对象
小白鼠。
㈢器材与药品
缺氧瓶(装有管道瓶塞的250ml广口瓶),酒精灯,一氧化碳发生器,1ml注射器,5ml和2ml刻度吸管,粗天平(附砝码),剪刀,普通镊。
钠石灰(氢氧化钠、氧化钙),甲酸,浓硫酸,0.125%氰化钾溶液,1%亚硝酸钠溶液,10%硫代硫酸钠溶液。
㈣步骤与观察
表8-3-1 观察指标
呼 吸 机能状态 皮肤粘膜颜色
类 型 (频率、幅度) (活动度)
––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––
低氧
一氧化碳中毒
氰 化 钾中毒
⒈低氧性缺氧
⑴将小白鼠至于250ml广口瓶(内装钠石灰吸收二氧化碳)中观察上述指标。
⑵将瓶塞紧,同时记录时间,每5min重复观察上述指标一次(如有变化则随时记录)直到动物死亡为止。
⒉一氧化碳中毒性缺氧
⑴如图8-3-1装好一氧化碳发生装置。
⑵将小白鼠一只放入瓶中,观察上述指标。
⑶取甲酸3ml放入试管内,加入浓硫酸2ml,塞紧。如气泡产生较少,可用酒精灯加热,加速一氧化碳的产生(但不可过热以至液体连续沸腾,因一氧化碳产生过快,动物迅速死亡,血液颜色改变不明显)。
⑷在整个过程中,注意观察上述指标。
(注):一氧化碳产生原理:
H2SO4
HCOOH CO↑+H2O
△
⒊氰化钾中毒性缺氧
⑴称小白鼠体重,观察上述指标,预先准备1%亚硝酸钠及10%硫代硫酸钠各10ml·Kg-1,以备急救用。
图8-3-1 一氧化碳发生装置
⑵腹腔注射0.125%氰化钾9ml·Kg-1,立即观察上述指标。
⑶待小白鼠出现共济失调或竖尾时,将准备好的急救药注入腹腔。
⑷重复步骤⑵,不予抢救。
⑸将三种缺氧实验动物尸体打开腹腔,比较血液或肝脏颜色。
附:硫代硫酸钠(Na2S2O3)及亚硝酸钠(NaNO2)急救机制
Na2S2O3是一种氧化剂,能使血红蛋白氧化成高铁血红蛋白,后者与氰酸根结合成氰化高铁血红蛋白,使细胞色素氧化酶解脱出来,从而恢复细胞的生物氧化功能。
Na2S2O3在体内S与HCN结合变成无毒性的HCNS由肾脏排出。
Na2S2O3+CO2+H2O NaHCO3+NaHSO3+S
HCN+S HCNS
㈤注意事项
吸取硫酸与甲酸时,注意不要溅到衣服或皮肤上。CO中毒实验完毕后,及时处理CO发生器内的残余物。
㈥思考题
注射亚硝酸盐,所观察指标有改变,为什么?
二、呼吸功能衰竭
㈠目的与原理
本实验通过复制呼吸功能衰竭的病理模型,观察血气和呼吸的变化,并分析其机制。
呼吸功能包括外呼吸、内呼吸和气体运输功能。呼吸衰竭指的是由于外呼吸功能严重障碍,以致动脉血氧分压低于正常范围的病理过程。肺通气障碍或/和肺换气功能障碍都可导致呼吸功能衰竭。
㈡实验对象 健康成年兔。
㈢器材与药品
兔手术台,哺乳动物手术器械一套,连接三通的动脉插管,二道生理记录仪,张力换能器,血气分析仪,输液装置。
20%氨基甲酸乙酯溶液,1%肝素生理盐水,生理盐水,10-3肾上腺素。
㈣步骤与观察
⒈麻醉与固定 取兔一只,称重,从耳缘静脉按5 ml·kg -1注射20%氨基甲酸乙酯溶液。麻醉后将兔仰卧位固定于兔台上。
⒉颈部手术 剪去颈部被毛,切开皮肤,分离皮下组织,作气管插管,再分离左侧颈总动脉,作动脉插管(插管内充满肝素生理盐水)。分离右侧颈外静脉,作静脉插管,并与输液装置相连,缓慢输入生理盐水。
⒊血气分析 用2ml注射器先抽取少许肝素,润湿注射器壁后推出,使注射器死腔和针头内充满肝素溶液,然后略松支动脉夹放血注许,冲去动脉插管内的肝素生理盐水,再用肝素处理过的注射器与动脉插管相连,让血液自动流入注射器内(切勿进入气泡),取血1ml,采血后迅速套上带软木塞的针头,作血气分析。
⒋呼吸运动的描记 将张力换能器上的挂钩钩在兔剑突部位的皮肤上,调节挂钩与换能器敏感梁之间的牵引线,使张力适中,且牵引线须垂直。将换能器与二道
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