用体积排阻色谱法研究变性溶菌酶分子复性过程中集聚体的形成.pdfVIP

!# 年$ 月 色 谱 !#$ !$ %$ ! %’() !# !#$%% ’()*$+, (- !*(.+/(0*+1 2 *!+ , *$$ 体积排阻色谱法研究变性溶菌酶分子复性过程中集聚体的形成 边六交， 杨晓燕， 刘 莉 （西北大学生命科学院基因工程中心，陕西 西安 6 *D+ ） 摘要：在体积排阻色谱柱上研究了还原剂存在时脲和盐酸胍变性的$ 种溶菌酶溶液的复性和分离过程。当变性液 中原始溶菌酶浓度大于 * ’( ) 时，变性溶菌酶在体积排阻色谱柱上除了复性为与未变性溶菌酶出峰时间相同的复 性态溶菌酶分子外，还形成了溶菌酶折叠中间体的二分子集聚体。这个结果得到了用稀释法复性时溶菌酶的蛋白 电泳检测结果的支持。与稀释法复性相比较，用体积排阻色谱法复性时所形成的折叠中间体二分子集聚体的量要 远远低于用稀释法所形成的集聚体的量。 关键词：体积排阻色谱法；溶菌酶；复性过程；集聚体 中图分类号： *D#/E E E 文献标识码：+ 文章编号：*,/6 *$ （!# ）!, *!+,# !#$%’ () *(+,-%() (. /00+0-’ .+(, 1)-#+$ 23’(43,’ #5() 6)-#+%)0 7%8 !%4 9:;#’%() =8+(,-(0+-583 -.+% )/01 /2 ，3+%4 5/2627 ，).8 )/ （!# $% ’ (#)#*+#%+#* ，!,,* ’ - +’ ./+#/ ，0 % $123 $ 4#+5%3+$6 ，7 + ’8# !##$% ，!1+#8 ） /’+-; ：.7 9:;9 =0:6 ; 9;72092/7 ?;@27/=? A :;7209;: B9;/7 /7 :;720927 =#0/7 ，; 9;72092/7 27: =;B292/7 B9@;== A9 9;; C/7:= A #6=D6?; ?#;@0#;= ，E/@ E;9; =;B292;#6 :;7209;: F6 09;2 27: ’027/:/7; 6:9@#9/:; /7 ; B9;=;7@; A 9;:0@/7’ 2’;7= ，E2= =0:/;: F6 =/D; ;G@#0=/7 @9?2’92B6 $ H;7 /7//2# #6=D6?; @7@;792/7 /7 :;720927 =#0/7 E2= ?9; 27 * ’( ) ，; :;7209;: #6=D6?; ?#;@0#;= E;9; 9;7209;: 27: /=#2;: /7 2 =/D; ;G@#0=/7 @9?2’92B/@ @#0?7 $ + 9;A#:;: #6=D6?; /7;9?;:/2; ，2 F/,?#;@0#29 2’’9;’2; ，E2= A07:$ I/= 9;=0# E2= @7A/9?;: F6 77,9;:0@/7’ =:/0? ::;@6# =0#A2;,B#62@96#2?/:; ’;# ;#;@99;=/= （JKJ, L+ 4M ）272#6=/= A 9;7209;: #6=D6?; ?#;, @0#;= E/ ; :/#0/7 ?;:$ N?B29;: E/ ; :/#0/7 ?;: ，; 2?07 A ; F/,?#;@0#29 2’’9;’2; A07: F6 =/D; ;G@#0=/7 @9?2’92B6 E2= A29 #;== 27 2 A07: /7 ; :/#0/7 ?;:$ I/= 9;=0# =E= 2 ; B9@;== A9 ; 9;7209/7’ A :;7209;: #6=, D6?; ?#