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山东省2015年高考生物 专题2 微生物的培养和利用教学案 新人教版选修1.doc
第2讲 微生物的培养和利用
备考·最新考纲
微生物的分离和培养。 2.某种微生物数量的测定。 3.培养基对微生物的选择作用。 4.利用微生物发酵来生产
考点1 微生物的实验室培养(5年15考)
(2013新课标全国Ⅱ卷、四川理综、江苏卷北京卷、浙江、山东天津)
一、培养基
概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求配制出的供其生长繁殖的营养基质
营养构成
培养基的种类及用途
划分标准 培养基的种类 特点 用途 物理性质 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 半固体
培养基 观察微生物的运动、鉴定 固体培养基 微生物的分离与鉴定、活菌计数、菌种保藏 化学成分 天然培养基 含化学成分不明确的天然物质 工业生产 合成培养基 培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成 分 用途 选择培养 培养基中加入某种化学物质以抑制不需要的微生物的生长促进所需要的微生物的生长 培养、分离出特定微生物(如在培养酵母菌和霉菌时可在培养基中加入青霉素;在培养金黄色葡萄球菌时可在培养基中加入高浓度的食盐等) 鉴别 根据微生物的代 鉴别不同种类的微生物如可用伊红—美蓝培养基检测饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有菌落呈深紫色并带有金属光泽) 特别提醒 自养微生物与异养微生物所需的营养物质不同:
自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物而异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物因此可根据NH3既作为硝化细菌的氮源也作为能源。
二、无菌技术
消毒
灭菌
消毒和灭菌比较项目 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭 消毒 较为温和 部分生活状态的微生物 不能 灭菌 强烈 全部微生物 能 三、微生物的纯化培养及菌种的保藏
原理
在培养基上将细菌稀释或单个细胞使其长成单个的菌落这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
制备固体培养基的流程
―→―→―→
3.纯化大肠杆菌的方法
常用的微生物接种方法有平板划线法和稀。
(1)平板划线法:是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。(如下图示)
(2)稀释涂布平板法:是将菌液进行一系列的梯度稀释然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。(如下图所示)
系列稀释操作(如下图所示)
涂布平板操作(如下图所示)
(3)两种纯化细菌的方法的比较
项目 优点 缺点 适用范围 平板划线法 可以观察菌落特征对混合菌进行分离 不能计数 适用于好氧菌 稀释涂布平板法 可以计数可以观察菌落特征 吸收量较少较麻烦平板不干燥效果不好容易蔓延 适用于厌氧菌和兼性厌氧菌 4.培养
接种后的培养皿放入恒温箱内培养
菌种保藏
(1)临时保藏
(2)长甘油管藏法放在-20__℃下保存
特别提醒 (1)配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项
倒平板的适宜温度是50 ℃左右温度过高会烫手过低培养基又会凝固。
②平板需倒置这样既可使培养基表面的水分更好地挥发又可防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。
(2)平板划线操作的注意事项
第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环。
灼烧接种环待其冷却后才能伸入菌液
③划线时最后一区不要与第一区相连。
④划线用力大小要适当,防止用力过大将培养基划破。
微生物培养与分离的考查
(2013·江苏)某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是( )。
培养基分装到培养皿后进行灭菌
转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线
接
D.培养过程中每隔一周观察一次
解析 本题考查微生物的分离和培养过程中的操作要求和培养条件等相关知识意在考查考生的知识运用能力和实验处理能力。培养微生物的过程中应先灭菌再倒平板错误;每一次划线前都要进行接种环的灼烧灭菌正确;接种后的培养皿应在恒温培养箱中进行培养光照会影响温度等条件;培养过程中观察间隔的时间一般不超过24 h。
答案 B
微生物实验室培养的拓展应用
(2013·新课标全国Ⅱ理综)临床使用抗生素前有时需要做细菌耐药实验。实验时首先要从病人身上获取少量样本然后按照一定的实验步骤操作以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。
回答下列问题:
(1)为了从样本中获取致病菌单菌落可用____________法或____________法将样本接种于固体培养基表面经过选择培养、鉴别等步骤获得。
(2)取该单菌__________法接种于固体培养基表面在37 ℃培养箱中培养24 h使其均匀生长布满平板。
(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置培养一段时间后含A的滤纸片周围出现透明圈说明该致病菌对抗生素A____________;含B的滤纸片周围没有出现透明圈说明该致病菌对抗生素B_________
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