实验四抗坏血酸注射液的稳定性试验.pdfVIP

实验四 抗坏血酸注射液的稳定性试验 一、实验目的 1. 掌握处方设计过程中稳定性实验的一般方法。 2. 掌握恒温加速实验预测药物制剂贮存期或有效期的方法（经典恒温法）。 3. 了解新药稳定性试验方法。 二、实验指导 本实验以抗坏血酸为模型药物，因其分子结构中具有不稳定的烯二醇基，极易被氧化。 影响抗坏血酸溶液稳定性的因素，主要有空气中的氧、金属离子、pH、温度及光等，对 固体抗坏血酸，水分和湿度影响很大。处方设计过程需要探讨这些因素对本品稳定性的影响。 由于药物在室温下变化较慢，因此研究药物稳定性通常采用加速实验方法，即在较高的 温度下来观察药物的物理化学性质的变化，观察指标是药物最易变化的那些性质，对于注射 液一般以含量、色泽、澄明度、pH 四项为稳定性质量指标，本实验以含量变化与颜色变化 为观察指标。 本实验含量测定采用碘量法，主要利用抗坏血酸的还原性，可与碘液定量反应，颜色变 化是测定溶液波长 430nm 处的透光率或与药典规定的标准色进行比较，以确定变色的程度。 含量测定具体方法如下：精密量取相当于 1g（5%抗坏血酸溶液 2ml），加蒸馏水 85ml（若处 方中加有亚硫酸盐类抗氧剂，则再加丙酮 2ml），稀醋酸 4ml与淀粉指示液 1ml，用0.1mol/L 碘标准溶液滴定至溶液呈持续的蓝色 3s 不褪即得。（1ml0.1mol/L 碘液相当于 8.806mg 的抗 坏血酸）。 抗坏血酸的氧化降解，实验证实为一级反应，浓度与时间的关系符合下式 kt −lg C + lg C 0 （4-1） 2.303 式中C为抗坏血酸在t时的浓度，C0为初浓度，由式 4-1 的斜率可求出速度常数k。 反应速度常数 k 与绝对温度之间的关系，可用 Arrhenius 公式表示 E lg k − lg+A （4-2） 2.303RT 以lgk对 1/T进行回归，便可求得直线的斜率与截距，从而求出活化能E与频率因子A。 再将E与A代入 4-2 式便可求出室温下的k值，将此k值代入 4-1 便可算贮存期或有效期t0.9 0.1054 （ ） 0.9 t k 25 三、实验仪器与试剂 空安瓿、二氧化碳钢瓶、灌注器、熔封灯、蒸锅、天平、容量瓶、玻璃棒、烧杯、量筒、 量杯、紫外可见分光光度计、标准比色管、pH计、滴定管、三角瓶等 维生素 C、碳酸氢钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、半胱氨酸盐酸盐、依地酸二钠、注射 用水、硫酸铜、稀醋酸、淀粉指示液、碘标准溶液等 四、实验内容与操作 1.溶液中与安瓿空间氧的影响 将下述 4 种样品分别装于布袋内同时放入沸水浴中进行加速实验，定时取样测定透光率（同 时与标准色号比较，标准色号的配制见中国药典附录），3小时后测定含量记录于表 4-3 中 按表 4-1 方法进行操作 表 4-1 溶液中及安瓿空间氧的影响实验操作方法 样品号 操作方法 1 配制 5%抗坏血酸 250ml，取样测定含量，并于波长 430nm 处测定透光率，记 录样品色号。取 40ml 溶液灌于 2ml安瓿中，每只 2ml，熔封，标上样品号。将样 品放入沸水浴中进行加速实验，定时取样，测定透光率（同时与标准色号比较）， 3h 后测定含量。 2 取 1 号剩余溶液 50ml，灌于 2ml安瓿中，每只 2ml，安瓿空间通CO2或N2 15 秒，立即熔封，标上样品号。其他操作与 1同。 3 取 1 号剩余溶液 100ml，并通入CO 或N 约 2～3 分钟，立即灌于 2ml安瓿中， 2 2 每只 2ml，其中 25 支熔封，标上样品号。其他操作与 1 同。 4 取 3 号剩下的 25 支灌好的安瓿，在安瓿空间通CO 或N 15 秒，立即熔封，标