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骨髓检验 复旦大学附属华山医院 陈勤奋chenqinfen@126.com 主要内容 骨髓细胞学检查 细胞形态学 细胞化学染色 免疫表型分析 染色体分析 基因诊断 骨髓病理学检查 组织结构 免疫组织化学染色 骨髓检查流程 1.骨髓检查适应证 造血系统疾病 某些血液病及其相关疾病 某些寄生虫感染性疾病 恶性肿瘤骨髓转移 某些类脂质沉积病 待查 贫血原因待查 发热原因待查 淋巴结肿大原因待查 肝脾肿大原因待查 骨痛原因待查 2.标本制备 取材部位：髂后、髂前上棘、胸骨、棘突、病灶部位 采集、涂片 染色：瑞氏（Wright）染色或瑞-姬（Giemsa）混合染色 Bone Marrow Aspirate 3.镜检 低倍镜 制片质量 增生程度（5级） 巨核细胞计数 异常细胞筛查 选择油镜检查区域 油镜 有无造血岛 细胞形态观察 有核细胞分类计数 计算粒红比值 有无异常细胞及寄生虫 4.分析 要结合外周血象来分析 对疑难细胞或不典型标本的处理 借助其他方法：化学染色、免疫表型分析 两个阶段间的细胞，计入下一阶段 换部位重抽或定期复查 形成骨髓象检查报告 描写细胞形态与数量，作出肯定性诊断、支持性诊断、排除性诊断或形态学描写。 注意事项 骨髓片应制作良好，才能进行形态学观察 正常骨髓象 有核细胞增生活跃 粒红比值为2~4：1，平均3：1 各系细胞比例、形态、染色大致正常 巨核细胞7~35个/1.5x3cm2，多为产板型 可见少量单核细胞、浆细胞、骨髓基质细胞、组织嗜碱细胞、成骨细胞、破骨细胞等 核分裂细胞约为0.1% 骨髓有核细胞增生程度 各系细胞 粒系细胞：原粒、早幼粒、中性幼粒、中性杆状核、中性分叶核、嗜酸性、嗜碱性粒细胞 红系细胞：原红、早幼红、中幼红、晚幼红 淋巴细胞：成熟、原淋、幼淋 巨核系细胞：原始、幼稚、颗粒型、产板型 少量单核细胞、浆细胞、骨髓基质细胞（成纤维细胞、内皮细胞、脂肪细胞、巨噬细胞等）、组织嗜碱细胞、成骨细胞、破骨细胞 细胞化学染色（cytochemical stain) 髓过氧化物酶（POX）染色 酯酶（esterase）染色 中性粒细胞碱性磷酸酶（ALP）染色 糖原（PAS）染色 铁染色 一些名词缩写介绍 AML：急性髓系白血病 AML-md：微分化型（AML-M0） AML-wom：未成熟型（AML-M1） AML-wm：成熟型（AML-M2） AMML：急性粒-单核细胞白血病（AML-M4） AMoL：急性原单核细胞和单核细胞白血病（AML-M5） AEL：急性红白血病（AML-M6） AMegL：急性巨核细胞白血病（AML-M7） 一些名词缩写介绍 ALL：急性淋巴细胞白血病 APL：急性早幼粒细胞白血病 CML：慢性髓性白血病 CLL：慢性淋巴细胞白血病 AA：再生障碍性贫血 PNH：阵发性睡眠性血红蛋白尿 MDS：骨髓增生异常综合征 IDA：缺铁性贫血 RARS：难治性贫血伴环形铁粒幼细胞增多 POX染色 正常细胞染色反应（-～++++） 存在于髓系细胞胞质中，愈成熟反应愈强，原粒C（-）。 原单C（-），幼单C和单核C（±）。 淋巴、巨核、幼红细胞（-） 临床意义 AML-md（-） AML-wom（-） AML-wm（+++） AMML（+） AMoL（-/±） AMegL（-） ALL（-） 酯酶染色 三种酯酶 特异性酯酶(SE) 非特异性酯酶(NSE) 单核细胞酯酶(ME) 用于鉴别诊断AML亚型 酯酶染色（正常细胞反应） 酯酶染色（临床意义） ALP染色 正常中性粒细胞染色反应（-～++++） 10%~40%（+） 积分7~51 临床意义 鉴别感染性疾病的类型（细菌感染时酶活性增强） 鉴别CML和类白 鉴别AA和PNH 鉴别真性红细胞增多症和继发性红细胞增多症 PAS染色 正常细胞染色反应 粒系细胞：中幼粒以下阶段（+~+++）；巨核系和PLT:（+++） 淋巴、单核:（ ±） 幼红C、RBC:（-） 临床意义 ALL、淋巴瘤细胞白血病：（+++，粗颗粒或块状）； AML-wom：（-）；AMML：（+,弥漫,细颗粒） CLL：（+，粗颗粒） 幼红细胞克隆增生：（+，粗颗粒或块状）； 幼红细胞良性增生：（-） 铁染色 正常染色反应（-～++++） 细胞外铁：+~++ 铁粒幼细胞：19%~44%，无环形铁粒幼细胞 临床意义 鉴别IDA与非IDA 诊断铁粒幼细胞性贫血 诊断MDS-RARS 几种常见AL的细胞化学染色结果 细胞免疫表型（immunophenotypes）分析 标本：血液、骨髓、淋巴结穿刺液、胸腹水、脑脊液、肺泡灌洗液 临床意义 急性白血病和淋巴瘤的分型诊断与疗效、预后判断 成熟淋巴细胞肿瘤的分类诊断 淋巴细胞免疫表型分析判断免疫功能 造血干细胞计数 方