狂犬病ERA株G基因及其缺失片段表达载体的构建和糖蛋白的表达.pdfVIP

广●土季 狂犬瘸ERA株G基因及其炔失基因真核表达载体的构建和糖蛋白的表达 狂犬病ERA株G基因及其缺失基因真核表达 载体的构建和糖蛋白的表达 摘要 狂犬病病毒糖蛋白至少有三种不同构型：自然形式(N)、激活的水溶性状 态CA)和融合灭活构型(1)。当狂犬病病毒侵入宿主细胞时，糖蛋白调控使 病毒囊膜与胞内体膜发生融合。胞内体内低PH的条件可造成糖蛋白构型的改 变，并激活融合。当PH为5．8-6．0时病毒可发生融合，而在PH6．3以上就 不能检测到此现象。因此，确定狂犬病糖蛋白融合的功能域，了解融合的机制 对狂犬病的控制就具有深远意义。 I／BstX 上。用EcoR 达糖蛋白的细胞克隆，将其挑出扩大培养。稳定传代后抽提细胞总DNA，用 也检测出了表达糖蛋白抗原，证明目的基因已经转染进细胞中，并且得到转录 和表达。而且在阳性细胞冻存一个月后复苏，细胞仍具有G418的抗性，并能 检测出目的蛋白，说明了G基因在细胞的传代及培养过程中不会丢失，且能稳 定表达，从而为进一步研究狂犬病糖蛋白的融合性奠定了坚实的基础。 ￡!苎!至垄塞呈堡垒堡曼苎里墨苎堡鲞墨望塞堡耋垄塑堡竺塑堡塑篓曼鱼竺墨竺 关键词：狂犬病病毒糖蛋白融合表达 2 广●土学 狂犬病ERA株G基因及其炔失基因真核表达载体的构建和糖蛋白的表达 CONSTRUCTlONOFRECOMBDlANTPLASMIDSOFGGENEOF RABIESERA DELETED VIRUSSTRAINANDIT’S MUl：f6LNTS ANDEXPRESSl0N0F 0N GLYCOPROTEINBHK一21CELLS ABSTRACT The at rabiesvirus assumeleasttheedifferent glycoprotein(GP)can conformational states：thenatural stateand state(聊，the the ofrabiesvirusintohostcells fusion fusion—inactive(I)state．The entry requires oftheviral withaendosomalmembrane．Rabiesvirus—induced envelope membrane fusion ismediatedviralGP．Fusionis atalow induced by triggered PH，which conformationalofthe that fusionisoccured changes glycoprotein．It’Sreported aroundPH5．8—6．0andisnotdetectedabovePH