薄板层析.docVIP

薄层色谱法 维基百科，自由的百科全书 （重定向自薄板层析） 薄层色谱 黑墨水在TLC板上的分离 英文缩写 TLC 分类 色谱法 其它技术 相关技术 琼脂糖凝胶电泳SDS 查?·?论?·?编 英语：Thin layer chromatography，简称TLC，又称为薄层层析）是一种用于分离混合物的色谱技术。[1]?在分析化学特别是针对有机化合物的分析中，薄层色谱是极为重要的分离方法。 薄层色谱在覆盖有很薄一层吸附剂的玻璃板、塑料片或铝箔上进行。吸附剂又称为薄层色谱固定相：常为硅胶、氧化铝或纤维素。操作时先将待分离样品用毛细管点于板上，然后在密闭的层析缸中，用单一或混合溶剂作为流动相，由流动相的毛细作用缓慢地将混合物样品中的不同组分由下而上爬升至板的顶端。因为样品中各组分与固定相的作用力不同，在流动相中溶解度也不同，导致各组分的上升速度有差异而最终在板上形成上下不一的斑点，从而达到分离混合物的目的。[2] 薄层色谱在监测反应进程，鉴定特定化合物以及测定物质的纯度等均有广泛的应用，如：分析神经酰胺与脂肪酸；检测在食物和水中的农药或杀虫剂；在法医的工作中，分析纤维的染料成份；化验放射性药物的放化纯度；鉴定药用植物及分析其内部成分。[3] 高效薄层色谱是对经典薄层色谱的改进法之一，该法中色谱的灵敏度和分离度都有很大的提高，可以准确地检出极微量的物质。 目录 ??[隐藏]? 1?薄层板的制作 2?薄层层析技术 2.1?操作 2.2?Rf值 2.3?洗脱剂（流动相） 3?制备TLC 4?分析与显色 5?应用与实例 6?参考文献 7?参见 编辑]薄层板的制作 市面上根据薄层层析板（如硅胶G板或聚酰胺板）的固定相标准颗粒大小分为不同规格，通常颗粒越细分离效果越好。制作时首先将吸附相（如硅胶）与少量惰性粘合剂（如硫酸钙）和水混合形成的浆状物，均匀地铺于以玻璃片、厚铝箔或塑料制成的载板上。铺过固定相的板先晾干，然后在烤炉内于110℃加热三十分钟进行活化。用于分析鉴定时吸附剂厚度一般为0.1–0.25毫米，而用于制备时（见下文）则为0.5–2.0毫米。[4] [编辑]薄层层析技术 展开一个TLC板，一个紫色的斑点被分离为一个红色斑点与一个蓝色斑点 10种精油通过薄层色谱展开后，再使用香草醛试剂显色后的效果。 薄层层析的操作过程类似于纸色谱法，原理方面类似于柱色谱，因而与纸色谱相比具有很多优势，如它分离效果好，灵敏快速，对于固定相的选择更多，且TLC的结果还可作为柱色谱的参考。由于以上的诸多优势，使薄层层析技术成为当今检测化学反应、定性分析化合物和分离化合物的最常用的手段。实验室常用的是硅胶薄层色谱，其制作简单、成本低廉且用途广泛。在化学技术当中，符合这几点的技术方法并不多见。 [编辑]操作 薄层色谱的步骤如下：[5] 点样：将试样溶液用毛细管在层析板上距离板底部约1.5厘米的位置点若干下（次数根据样品浓度而定），并静置顷刻（或加热）以使溶剂完全蒸发。若溶剂难以挥发，则点样之后需要将板放于真空容器中干燥后再使用。溶剂的蒸发是必须的，否则残留的溶剂会与流动相作用，降低流动相的均一性，导致分离效果变差。 将少量合适的溶剂（流动相）倒于一个合适的玻璃器皿（展缸）中，让流动相高度不超过1厘米，并在上面放上表面皿使溶剂蒸气在展缸中饱和。可在展缸底部放上一张滤纸，让滤纸底部浸没于溶剂中并靠在展缸内壁，过几分钟后让洗脱溶剂蒸发并在展缸空间内饱和。若不经过以上步骤可能会导致分离度的下降或使结果不具重复性。 然后将层析板置于展缸内（样品点不可触碰溶剂表面），盖上盖子让溶剂通过毛细现象缓慢爬升。溶剂遇到样品混合点时，会带着样品上升（即洗脱样品）。当溶剂快到层析板顶端时，将板拿出，迅速记录溶剂到达的高度并晾干。不要让溶剂爬升到达板的顶部。 [编辑]Rf值 对于确定的固定相，混合物样品中不同的化合物在层析板上爬升的速度不同，这是由于它们对于固定相的吸附能力不同，对于洗脱剂的溶解能力也不同。改变不同的洗脱溶剂，或用不同溶剂配成混合洗脱剂，化合物的分离效果可自行调节。组分在板上的分离情况一般用比移值（Rf）的大小来表征。薄层色谱板上的分离情况还可用于预测柱色谱或快速柱色谱的分离效果。[6] Rf值定义：Rf=S/L，其中L表示从原点至溶剂前沿距离；S表示化合物从原点至终点距离。图注：Startlinie = 样品的起始线Substanzfleck = 样品中某成份的显色点Laufmittelfront = 溶剂到达的位置 由于薄层色谱中很难产生均匀的吸附剂涂层，且薄板的质量与吸潮程度亦参差不齐，所以即便是同一物质在同类型而不同的层析板上得到的比移值也难以完全一致。相比于纸色谱这是薄层色谱的缺点。操作中常常将标准试样与试样在同一薄板上同时展开并点上混合点