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P 物质增强谷氨酸诱发的大鼠皮肤 Aδ 和 C 类传入纤 维的电活动 张琪，赵晏*，郭媛，曹东元，姚繁荣，王会生 环境与疾病相关基因教育部重点实验室，西安交通大学医学院生理学与病理生理 学系，西安，710061 E-mail ：Zhaoy502@ 中文摘要：本研究采用在体分离脊神经背侧皮支单纤维记录的方法，观察 了相应皮肤感受野注射小剂量P物质（Substance P，SP）、谷氨酸（Glutamate， Glu ）以及联合注射SP和Glu对皮肤A δ和C类传入单位放电的影响。结果显示： ①将 1µM SP 溶液 10 µL 注射入皮肤感受野，6％的 Aδ单位和17％的 C 类单位 被兴奋，但 Aδ和 C 类单位在注射后 10 min 的平均放电率与注射前相比无显著 差异（P ＞ 0.05 ）。②10µM Glu 溶液 10 µL 注射入皮肤感受野后，Aδ和 C 类 单位的兴奋比例分别为35％和33％，两类单位在注射后10 min的平均放电率与 注射前比较均显著增加（P 0.01）。③2µM SP5µl＋20µM Glu5µl 联合注入 Aδ 和 C 类单位的感受野后，84％的 Aδ和 83 ％的C 类单位兴奋，注射后 10 min 两 类单位的平均放电率与注射前相比均显著增加（P 0.01）。注射SP＋Glu的 Aδ 和C类单位反应比例高于单独注射Glu的比例（P 0.05），且其平均放电频率 也较单独注射Glu显著增加（P 0.01）。另外，本实验还观察了单独注射Glu 和SP＋Glu引起的 Aδ和C类单位传入放电的时程变化，发现注射SP＋Glu较单 独注射 Glu 的放电时程显著延长。结果表明，在外周神经末梢 SP 和 Glu 具有协 同作用。 关键词：P 物质；谷氨酸；初级传入纤维；痛敏化 - 1 - P 物质（Substance P，SP）和谷氨酸（Glutamate，Glu）是中枢神经系统 的主要兴奋性神经递质。近年来的研究发现，初级感觉神经元兴奋时，SP和Glu 不仅能由初级感觉神经的中枢端释放，也能由外周末梢释放[1-2] 。在脊髓背角神 经元 SP 对 Glu 的效应有增强作用，是 windup 现象和中枢敏化的重要机制[3-5] 。 然而，在外周神经 SP 对 Glu 是否具有相类似的增强作用尚不清楚。形态学研究 表明，支配皮肤的各类感觉神经纤维存在SP和Glu的受体亚型[6-8] 。如果给大鼠 足底注射 SP 或 Glu，均能引起该区域热和机械痛过敏，而相应的受体拮抗剂则 能阻断这种痛过敏反应[6-7,9] 。此外，Carlton 等研究发现局部注射 SP 可以增强 [9] Glu诱发的伤害性行为反应 ，提示SP和Glu可能在外周神经末梢有相互作用， 然而尚缺乏相应的电生理学证据。我们以往的研究证实，SP 和 Glu 对皮肤感觉 神经纤维均有兴奋、敏化作用[10-12] 。为了进一步明确 SP 和 Glu 在外周皮肤神经 末梢的相互作用，本研究采用在大鼠脊神经背侧皮支分离神经细束的方法，观察 SP对Glu诱发的Aδ和C类传入纤维电活动的影响。 1 ．材料与方法： 1.1 手术及传入纤维放电的记录 实验选用成年健康 Sprague-Dawley 大鼠（重量220～260g）32只，雌雄不拘。 20％乌拉坦（1g/kg）腹腔麻醉后剖开背部皮肤，在解剖显微镜下分离出一侧T9～ T13脊神经背侧皮支。固定皮瓣做成油槽，内充37℃左右的液体石蜡。在近中枢 端将脊神经背侧皮支切断，将其搭放在一对双极铂金丝记录电极上，在显微镜下 用游丝镊子从神经干分离细束。将细束分离至能记录出单个神经纤维放电，观察 放电的频率、形式。传入单位放电输入VC-11双线记忆示波器（日本光电公司）， 并用SMUP生物信号数据分析软件（复旦大学医学院生理教研室研制）进行处理。 用 von F