新城疫病毒分离株F基因的序列分析及F-%2c48-E-%2c9-株和La+Sota株F基因的真核表达.pdfVIP

摘 要 定，证明获得阳性重组质粒后，进行序列测定并推导出其氨基酸序列，同时进行了分析和比较。序 根据122株国内外NDV 之间具有明显的基因型差异。而且还具有不同于国外流行的我国特有的基因型——基因Ⅸ型。通过 对NDvF基因核苷酸序列同源性比较及遗传变异分析发现：我国不同年代、不同地区分离的NDv毒 株与疫苗毒株之间在基因水平t存在较大差异，这种差异对氨基酸及蛋白质的结构和功能可能会有一定 影响，而NDvF蛋白的差异同时也造成免疫原性的差异，这很可能是新城疫的免疫防治十分困难的 原因之一。为了具体分析流行毒株和疫苗毒株之间的免疫原性差异情况和建立适用于检测ND免疫 和流行情况的方法，我们又分别表达了弱毒疫苗株Lasa衄和标准强毒株F4画的F蛋白。 基因特异性引物。将F4画株和La 性重组予并测序。测序正确后转化至E∞打DHl0B∞感受态细胞中，经庆大霉素、卡那霉素、四环 DNA，在质脂体 w如tem-b10t分析，证实NDvsota株的F蛋白均获得正确表达，所表达的重组F蛋白 F4函株和La 分子量约56KD，并证明在昆虫细胞内表达并部分糖基化，具有良好的反应原性。而我们用于表达 毒株特异性抗体，为详细分析强弱毒株的免疫原性差异，建立ELIsA诊断方法奠定了基础，同时对 于进一步研究NDV致病和免疫基础也有重要意义。 关键诃：新城疫病毒，F基因，序列分析，重组杆状病毒，蛋白表达 Abs仃act Inthis stlIdy’F惦ionglycopfotein(F)g髓e jsolat∞wm chaill c1∞edmto reverse咖sc却tasc rea州蚰OrI聪R)锄d aInplifiedby PloyIlleme p佃18-T wefeobt；linedand sequ卸cesof{he心IDA tlle证锄ino∽id∞quen∞s of F 3isoJat嚣w罄 compe他d．Thesequences粕alysis衲dic删付谢c0“驴le把0p锄r∞d妇0fg∞e F of553砌血时赫d孓11髓e吼6 1662bp锄d∞岫dprI№．m ide商cally t11e oftlIe ofF ofthe3 s沁s卸ddeduced锄ino∽id glycosyI拍0n scq嘴nce cleaVagesi惋re西onprote．m amino∞ids NDVi∞la把s血athad廿碡s锄e patt锄越vel99c11ic wjtlltlle瑚ultsofm啪de甜l吐me i11n．acereb阻I w船卸∞删锄t of“doen唧bf)roslMIyr}锄d patlIogeIlic竹mdcx(IcPD． Ontlleb嚣ic《世他first of NDV the other inC}linaand也esomesh血s 122 3蚰面ns，tlle sn苟瑚jncluding sh越璐i∞l疵d坤cently abmad