真核生物启动子对转录的影响.docVIP

真核生物启动子对转录的影响 启动子分为上游启动子元件和TATA区。TATA区使转录精确地起始;上游启动子元件的存在与否，对该启动子的生物活性有着根本性的影响，主要控制转录起始频率，基本不参与起始位点的确定。 真核生物RNA的转录后加工的过程 是指将各种前体RNA分子加工转变成有功能的、成熟的RNA的过程。 tRNA前体的加工：剪接内含子；3‘端添加-CCA-OH结构；修饰核苷酸。 rRNA前体的加工：在5‘端切除非编码的序列，生产41S中间产物；41S RNA再被切割为两段，一段为32S，一段为20S；32S RNA进一步被剪切成28S rRNA和5.8S rRNA；20S RNA被剪切生成18S RNA。 RNA编辑的生物学意义 校正作用，有些基因在突变过程中丢失的遗传信息可能通过RNA的编辑得以恢复。 调控翻译，通过编辑可以构建或去除起始密码子和终止密码子，是基因表达调控的一种方式。 扩充遗传信息，能使基因产物获得新的结构和功能，有利于生物的进化。 核酶分子的组成和分类。 同一核酶分子由具有催化中心的核酶和含有剪切位点的底物部分共同组成锤头结构，具有自我剪切能力的RNA大多数都能形成锤头结构，该二级结构由三个茎（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）构成，茎区是由互补碱基构成的局部双链结构，包围着一个由11~13个保守核苷酸构成的催化中心。可以分为剪切型核酶和剪接型核酶。 密码子的摆动配对现象 根据摆动假说，在密码子与反密码子的配对中，前两对严格遵守碱基配对原则，第三对碱基有一定的自由度，可以摆动，因而使某些tRNA可以识别1个以上的密码子。一个tRNA能识别多少个密码子是由反密码子的第一位碱基的性质决定的。 tRNA的三叶草形二级结构 受体臂：结合氨基酸的位点，主要由链两端序列碱基配对形成的杆状结构和3‘端未配对的3~4个碱基所组成。 TΨC臂：根据3个核苷酸命名，其中Ψ表示拟尿嘧啶。 反密码子臂：位于套索中央的三联反密码子。 D臂：含有二氢尿嘧啶。 tRNA的L型三级结构 保留了二级结构中由于碱基互补而产生的双螺旋杆状结构，又通过分子重排创造了另一对双螺旋。主要由在二级结构中未配对碱基间形成氢键（三级氢键）而引发的。 起始tRNA和延伸tRNA的区别 有一类能特异地识别mRNA模板上起始密码子的tRNA叫起始RNA，其他RNA统称为延伸RNA。原核生物起始tRNA 携带甲酰甲硫氨酸，真核生物起始tRNA携带甲硫氨酸，延伸tRNA没。 氨酰-tRNA合成酶 是一类催化氨基酸与tRNA结合的特异性酶，既能识别tRNA，又能识别氨基酸，使氨基酸与对应的tRNA相结合，它对两者都具有高度的专一性。 11、核糖体的构成、功能以及起始。 核糖体是一个致密的核糖核蛋白颗粒，可以解离为两个亚基，每个亚基都含有一个相对分子质量较大的rRNA和许多不同的蛋白质分子。核糖体上有许多个活性中心，每个中心都由一组特殊的核糖体蛋白构成。有3个tRNA结合位点。 在多肽合成过程中，不同的tRNA将相应的氨基酸带到蛋白质合成部位，并与mRNA进行专一性的相互作用，以选择对信息专一的AA-tRNA。有多个结合位点。小亚基负责对模板mRNA进行序列特异性识别，大亚基负责携带氨基酸及tRNA。 二硫键形成的作用 是蛋白质合成后通过两个半胱氨酸的氧化作用生成的，用来稳定蛋白的天然构象。 翻译-运转同步机制：分泌蛋白 信号肽假说：完整的信号肽是保证蛋白质运转的必要条件。仅有信号肽还不足以保证蛋白质运转的发生。信号肽的切除并不是所有运转所必需的。并非所有的运转蛋白质都有可降解的信号肽。 分泌蛋白质的合成和胞吐作用? 翻译后运转机制 ①线粒体蛋白质跨膜运转：通过线粒体膜的蛋白质在运转之前大多数以前体形式存在。蛋白质通过线粒体内膜的运转是一种需要能量的过程。 ②前导肽：拥有前导肽的线粒体蛋白质能够跨膜运转进入线粒体，在这一过程中前导肽被水解，前体转变为成熟蛋白，是去继续跨膜能力。 叶绿体蛋白质的跨膜运转：活性蛋白水解酶位于叶绿体基质内。叶绿体膜能够特异性地与叶绿体蛋白的前体结合。叶绿体蛋白质钱体内可降解序列因职务和蛋白质种类不同而表现出明显的差异。 重组DNA技术 重组DNA技术是指将一种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体（受体）内，使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序blotting）P402 基因治疗中的问题 靶向性基因导入系统：必须将治疗基因送入特定的靶细胞，并在该细胞中得到高效表达。 外源基因表达的可控性 治疗基因过少 核内不均一RNA：由DNA转录生成的初级转录产物，是mRNA的前体。 RNA的编辑：是某些RNA，特别是mRNA前体的一种加工方式，如插入、删除或取代一些核苷酸残基，导致DNA所编码的遗传信息的改变，因为