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3结果与分析
3.1 杀虫成分的分离提纯
3.1.1 粗提物活性
3.1.2 闹羊花素-III的分离提纯
对EtOAc萃取物进行200~300目硅胶柱层析,。
表3.2a 黄杜鹃花乙酸乙酯萃取物硅胶柱层析流分拒食和毒杀活性1) (1999.09 广州)
组分 流分号 菜粉蝶5龄幼虫2) 致倦库蚊3龄幼虫死亡率(%)3) 24h拒食率(%) 48h拒食率(%) 5d死亡率(%) 24h 48h 表中同列数据相同字母表示在5%水平差异不显著(DMRT法)。2. 试验浓度50mg/L重复15次,每次试虫1头。3. 试验浓度50mg/L,重复3次,每次试虫20~30头。
3.1.3 化合物1~4分离提纯
3.1.4化合物5~13的分离提纯
3.2 黄杜鹃花杀虫成分对害虫的生物活性
3.2.1 产卵忌避活性
3.2.1.1对产卵量的影响3.2.1.3对初孵幼虫存活的影响
3.2.1.4对黄曲条跳甲等几种害虫的忌避活性
3.2.2拒食活性
3.2.对菜粉蝶幼虫的拒食活性
3.2.2.2 对小菜蛾等几种害虫的拒食活性
3.2.3 生长发育抑制活性
3.2..1 对虫重增长的抑制
3.2.3.2 对个体发育的抑制作用
3.2.3.3 对生殖力的影响
3.2.4 触杀活性
3.2.5 胃毒活性
3.2.6 毒杀活性 (饲喂法)
3.2.7 对卵孵化和初孵幼虫存活的影响
3.3作用机理研究
3.3.1 对表皮成分含量的影响
3.3.1.1 对表皮粗成分含量的影响
3.3.2对几种酯酶活性的影响
3.3.2.1 对(-羧酸酯酶离体活性的影响
(略)
3.3.3.1.2 对Na-K-ATPase离体活性的影响
3.3.3.1.3 对Ca-ATPase离体活性的影响
3.3.3.1.4 对Ca-Mg-ATPase离体活性的影响
3.3.3.2 对ATPase离体活性的抑制中浓度(I50)
图3.7 R-III等化合物对Na-K-ATPase离体活性抑制I50和触杀毒力LD50的线性相关性
3.4 结构鉴定
3.4.1 闹羊花素-III结构鉴定
3.4.4 化合物5结构鉴定
3.5 闹羊花素-III的定量分析方法
3.5.1线性关系考察
图3.23 R-III薄层层析定量分析
3.6 构效关系分析
3.6.1 定性分析
3.6.1.1 C2、C3结构与杀虫活性的影响
3.6.1.4 C2,C5,C6-OH及其取代对活性的影响
3.6.2 Free-Wilson法分析
3.6.2.1 体系参数选择
4 讨 论
4.1 R-III的杀虫作用机理
4.1.1 作用于消化系统
4.1.1.1破坏中肠细胞生物膜系统
4.1.2.1 破坏神经系统组织,影响激素平衡
4.1.2.5影响呼吸作用
4.1.3 作用于解毒酶系
4.1.4 能源物质与生长发育抑制作用
4.1.5 作用于化学感受器
综上所述,可知 R-III是一种杀虫活性高、作用点多的天然化合物。
4.2 以ATPase作为靶标酶的筛选模型
4.4 黄杜鹃和-III的应用前景
4.5 QSAR及其在农药中的应用和前景
4.6 有待深入研究的几个问题
黄杜鹃及其主要杀虫成分R-III杀虫作用及其机理的研究,为把这种高活性的天然产物开发成一种新型较理想的杀虫剂提供了依据。尽管我们已基本明确了黄杜鹃杀虫作用方式,基本阐明了杀虫作用机理,并系地研究了杀虫成分及其活性,但仍有许多问题尚待深入研究,如:
1. 进一步研究黄杜鹃及其活性成分对特异性昆虫行为调控机理,特别是忌避机理的研究,尤其应引起我们的注意重视。目前国内外对非寄主植物产卵忌避作用的机理研究甚少,尤其是从分子水平上解释的报道更少,有许多问题有待于我们努力探索,应该运用现代生物、化学和物理技术,从分子水平上解释忌避机理,为把黄杜鹃开发昆虫产卵忌避剂的提供研究基础。
2. 进一步研究黄杜鹃的活性成分,筛选新型作用靶标和高活性化合物,进行结构与活性关系研究,为化学合成提供最佳简单、易合成、高效的母体结构,最终实现商品化大规模生产。
3. 直接应用商品制剂的研制及其环境行为研究。
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