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牛奶中蛋白质含量的测定 ---- 凯氏定氮法 一：实验目的：掌握凯氏定氮法测定蛋白质含量的原理 学会凯氏定氮法的操作技术 二：实验原理：◆蛋白质的含氮量较恒定，一般为 16%，上下略有浮动 ◆N/16%=N*6.25=蛋白质的含量 ◆样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出，而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。然后加碱蒸馏，使氨蒸出，用硼酸吸收，再以标准盐酸溶液滴定，测出释放的氨含量，并计算氮素含量，再乘以6.25即为蛋白质的含量。 ◆整个过程分三步：消化、蒸馏和吸收、滴定 1：消化：蛋白质 + H2SO4 → （NH4)2SO4 + SO2↑+ CO2↑+ H2O 瓶颈45度角倾斜 2：蒸馏：消化液 + 氢氧化钠加热蒸馏，放出氨气 2NaOH＋ (NH4)2SO4＝ 2NH3 ↑ ＋ Na2SO4 ＋ 2H2O 3：吸收与滴定（1）用4%硼酸吸收 （2）用盐酸标准溶液滴定 （3）混合指示剂（甲基红—溴甲基酚绿混合指示剂） 指示剂：红色———→绿色 ———→红色 （酸）吸收 （碱） 滴定 （酸） 3NH3 + H3BO3→ (NH4)3BO3 (NH4)3BO3+