第四章 酶.pptVIP

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第四章 酶 目 录 第一节 酶的概念及作用特点 酶及生物催化剂概念的发展 酶专一性类型 绝对专一性和相对专一性 消化道内几种蛋白酶的专一性 消化道蛋白酶作用的专一性 酶的化学本质及类别 第二节 酶的命名和分类(略讲) 第三节 酶的作用机理 酶催化的中间产物理论 酶作用专一性机理 酶专一性的“锁钥学说” 酶专一性的“诱导契合学说” 四、与酶的高效率有关的主要因素 酶分子中可作为亲核基团和酸硷催化的功能基团 胰凝乳蛋白酶分子中催化三联体构象 胰凝乳蛋白酶反应的详细机制(1) 胰凝乳蛋白酶反应的详细机制(2) 酶的活性中心和必需基团 胰凝乳蛋白酶的活性中心 羧肽酶活性中心示意图 第四节 影响酶促反应速度的因素 (酶促反应动力学) 酶促反应速度的测定与酶的活力单位 酶活力测定方法 酶活力的表示方法 影响对酶反应速度的因素 底物浓度对酶反应速度的影响 单分子酶促反应的米氏方程及Km 酶反应速度与底物浓度的关系曲线 米氏方程的推导 米氏常数的意义 米氏常数的测定 酶动力学的双倒数图线 酶促反应初速度的概念 pH对酶反应速度的影响 温度与酶反应速度的关系 激活剂对酶作用的影响 抑制剂对酶作用的影响 抑制剂类型和特点 竞争性抑制作用 非竞争性抑制作用 反竞争性抑制作用 竞争性非竞争性抑制作用机理示意图 竞争性抑制曲线 非竞争性抑制曲线 反竞争性抑制曲线 非专一性不可逆抑制剂 专一性不可逆抑制剂 第五节 酶的活性调节 酶的别构(变构)效应 酶的别构(变构)效应示意图 别构酶的动力学曲线 ATCase的结构及其催化链的别构过度作用 别构酶的序变模型 别构酶的齐变模型 酶的多种分子形式——同工酶 乳酸脱氢酶同工酶形成示意图 不同组织中LDH同工酶的电泳图谱 酶 原 的 激 活 胰蛋白酶原的激活示意图 第六节 酶工程简介 固定化酶 溴化氰亚氨碳酸基偶联法 戊二醛交联法 酶的改造和模拟 人工模拟酶?-benzyme 生物酶工程示意图 第七节 维生素和辅酶 重要的水溶性维生素及相应辅酶 主要可溶性维生素和相应辅酶 维生素pp和尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(磷酸) NAD(P)+ 维生素B2和黄素单核苷酸(FMN).黄素腺嘌呤二核苷(FAD) 泛酸和 辅酶 A(CoA) 维生素B1和焦磷酸硫胺素(TTP) 维生素B6和磷酸吡哆醛、磷酸吡哆胺 叶酸和 四氢叶酸(FH4) 维生素C 硫辛酸 羧 基 生 物 素 维生素B12 问答题 一、化学酶工程 ?天然酶 ?固定化酶 ?化学修饰酶 ?人工模拟酶 二、生物酶工程 ?克隆酶 ?突变酶 ?新酶 将酶学和工程学相结合,产生了酶工程(enzyme engineering)这样一个新的领域。酶工程主要研究酶的生产、纯化、固定化技术、酶分子结构的修饰和改造以及在工农业、医药卫生和理论研究等方面的应用。 将水溶性酶用物理或化学方法处理,固定于高分子支持物(或载体)上而成为不溶于水,但仍有酶活性的一种酶制剂形式,称固定化酶(immobilized enzyme)。 包埋法 吸附法 共价偶联法 交联法 OH OH BrCN H2O O O C=N-E O-CO-NH-E OH O-C-NH-E NH OH H2N-E (多羟基载体) O-CONH2 OH (惰性) O O C=NH (活泼) O—C —N OH OHC(CH2)3CHO 戊二醛 H2N-E N -HC=N-E-N=CH(CH2)3-CH=N- E- N CH CH 酶的改造:功能基团的化学修饰酶 酶蛋白侧链的化学修饰 酶分子内或间的交联反应 酶的模拟:根据酶作用的原理摸拟酶的活性中心和催化机理,用化学方法制备结构较简单,高效、高选择性、稳定性能好的新型催化剂,可以是无机化合物、有机化合物或小肽。 环糊精 催化侧链 催化侧链连接到环糊精上,可模拟胰凝乳蛋白酶 环糊精分子结构 环糊精结构模型 酶的蛋白质结构功能 新酶分子蓝图 选择性修饰方案 突变酶 新酶 克隆酶 产品 效用 发展 酶基因 遗传设计 遗传修饰 DNA重组技术 DNA重组技术 一、 维生素及其与辅酶的关系 ? 维生素(vitamin)——维持机体正常生命活动不可缺少的一类小分子有机化合物,人和动物不能合成它们,必须从食物中摄取。维生素可分为脂溶性(A,D,K,E)和水溶性两大类。当人体缺乏某种维生素

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