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第五章 蛋白质与核酸 第三节 蛋白质的性质 一、两性性质和等电点 蛋白质是由氨基酸组成的大分子物质。所以,与氨基酸相类似,蛋白质也是两性物质。 蛋白质中可解离的基团除了蛋白质分子末端的氨基和羧基外,主要是侧链-R基,如侧链的氨基、羧基、咪唑基、胍基、酚基、巯基等。 蛋白质的两性性质: H2N-Pr-COO- == +H3N-Pr-COO- == +H3N-Pr-COOH 在碱性条件下 在等电点 在酸性条件下 pHpI pH=pI pHpI 当蛋白质所带净电荷为0时的pH,就是该蛋白质的等电点。 处于等电点时蛋白质的性质 在等电点处,蛋白质颗粒间不存在静电相互斥力,所以,蛋白质的颗粒不稳定,极易借静电引力迅速结合成较大的聚集体,因此,在等电点处,蛋白质的许多物理性质,如粘度、溶解度、水化程度等也都降到最低。 二、胶体性质(一)蛋白质的相对分子质量 蛋白质是高分子化合物,由于相对分子质量大,它在水溶液中形成胶体溶液,所以蛋白质溶液具有胶体溶液的许多特征。 如蛋白质溶液有扩散现象、沉降现象、电泳现象和电渗现象。蛋白质胶体的渗透压较低,糖渍和盐渍时容易发生脱水现象,不能通过半透膜并具有吸附性等。 (二)蛋白质的水合作用 水和是指水分子和蛋白质分子中的一些基团的结合,1克蛋白质结合水的质量(克)称为蛋白质结合水的能力,也称为水合能力。 很显然,蛋白质分子的水合能力与氨基酸残基的组成和结构密切相关,残基中的带电基团越多,其水合能力也就越大。 影响水合作用的因素 --蛋白质带电性 蛋白质颗粒带电越多,蛋白质表面的电层厚度越大,因而在蛋白质分子周围偶极化的水分子就越多,水化层也就越厚。 影响蛋白质带电性的因素 1、决定于蛋白质颗粒中可解离基团的种类和数目。蛋白质中带电荷氨基酸与亲水性氨基酸含量越高,蛋白质带电性就越大。 2、决定于蛋白质溶液的pH。蛋白质溶液的pH与其等电点距离越远,蛋白质的带电性越大。在蛋白质的等电点处,蛋白质不带电,水化能力最低,很容易沉淀析出。食品加工过程中往往需要蛋白质有高的水化度,因此,调整食品的pH不失为较好的方法。如加工肉制品时,在肉中加入磷酸盐类的一个作用就是调整pH,使其远离肌肉蛋白质的等电点。 3、决定于蛋白质溶液的离子强度。 盐溶: 概念:中性盐溶液在较低离子强度下,由于蛋白质胶体可以吸附某些盐类离子而带电,使蛋白质分子之间彼此相互斥力增大,而蛋白质与水的相互作用却加强,促进了蛋白质的溶解与水化,这就是蛋白质的盐溶。 应用:在肉制品加工中,为了提高制品的嫩度和成品率,往往需要肌肉蛋白质发生盐溶,所以,肉制品加工前常用盐进行腌渍处理。 盐析: 概念:当加入的电解质的离子强度足够高时,由于盐类离子的水化能力高于蛋白质的水化能力,因而会夺取蛋白质表面的水分,同时,加入的盐离子还可以大量中和蛋白质颗粒上的电荷,使蛋白质成为既不带电荷也不含水化膜的不稳定颗粒而沉淀析出,这就是蛋白质的盐析。 经常使用的盐析剂是硫酸铵。 应用:利用盐析法,我们可以分离和提纯蛋白质。 (三)蛋白质胶体的稳定性 蛋白质胶体是亲水胶体,蛋白质在水中能形成热力学稳定的胶体溶液。其稳定因素有两个: 1、由于蛋白质表面分布着大量的亲水基团,它们能够吸引溶液中的水分子,使蛋白质颗粒被一层厚厚的水化膜包围,蛋白质颗粒被隔开而不易沉淀。 2、由于蛋白质是两性物质,在等电点以外任何pH时,都带有同种电荷,由于同电相斥,也阻止了蛋白质颗粒的凝聚。 三、变性作用 变性作用→性质发生改变-→结构改变→空间结构被破坏 ↓ ↓ ↓ ↓ ↓ 物性 化性 功能性 物理因素 化学因素 (一)概念 由于维持蛋白质空间结构(二级、三级、四级结构)的作用力主要是一些弱相互作用,所以蛋白质的空间结构容易受到各种物理、化学因素的影响而改变,但这种变化往往不涉及蛋白质一级结构的变化,我们把蛋白质的这种变化称作蛋白质的变性。 (二)变性蛋白质的性质 1、生物活性发生改变:蛋白质发生变性后,其生物活性发生改变,如丧失原有的生物功能、抗原性发生变化等。 2、化学反应活性增强:由于蛋白质的空间结构被破坏,尤其是蛋白质的三级、四级结构的被破坏,导致原来埋藏在蛋白质分子内部的化学基团暴露出来,使蛋白质的化学反应活性增强,比如,更容易被水解和消化; 3、物理性质发生改变:蛋白质的许多物理性质发生改变,如蛋白质的特性粘度增加、溶解度下降,甚至于发生凝聚和沉淀等。 (三)导致蛋白质变性的因素 1、物理因素: 温度, 紫外线照射, 超声波处理, 高压处理, 剧烈的振荡和搅拌, 研磨, 微波处理。 (1)热变性: 因
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