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家兔随机分为6组,第1组是对照组,静脉注射与实验组LPS同体积的
生理盐水后160rain时取材,第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、V、Ⅵ是实验组,静脉注射LPS后
Histopaque密度剃度离心获取单个细胞,在利用单核细胞的黏附特性进一
步分离获得单核细胞;用RT—PCR半定量方法检测LPS发热不同时相单核
blot分析LlX3发热不同时
细胞IL一1B和TNF—ctmRNA表达量,以Western
相单核细胞HSFl的表达量。
2.图象处理:
Chen
描,用其中的Huor V2.0分析软件分析各DNA扩增片段的密度IDV
值,将每一种目的DNA扩增片段密度与相应的内参照GAPDH扩增片段密
度的比值(e/c)作为其mRNA水平的定量指标;同样也用电泳凝胶成像分
V2.0分析
软件测定各组蛋白质带的IDV值,作为HSFl的相对含量。
3.统计分析;
所用实验数据均用均数±标准差(i±S)表示,各组均数间显著性差异
的比较用t检验,相关分析用相关性检验分析法,应用SAS统计软件。
实验结果
1.注射LPS后家兔的体温变化:
动物体温上升达第一个高峰1.3±0.32℃,之后略有回降,在注射LPS后
正常水平。发热组与对照组比较差异十分显著(P0.01)。
化:
降,320rain时回降至基础水平,与对照组相比差异显著(P0.01)。
3.U)S发热不同时相,单核细胞中HSFI表达量:
·2·
单核细胞中HSFl的总含量(包括三聚体和单体)在实验观察期间无明
显变化(P0.05);而HSFl三聚体含量随体温的升高逐渐增加,直到体温
降至正常水平,与对照组相比差异显著(P0.01)。
达量的关系:
963,r=一0.970,P0.01)。
结 论
1.LPS发热时单核细胞中HSFl活性三聚体含量增加。
2.LPS发热时单核细胞中HSFl活性三聚体含量与单核细胞内IL一
1侈、TNF—amRNA表达量之间呈负相关关系。
内生性致热原基因的表达而限制体温升高。
关键词:热休克因子l;白细胞介素1B;肿瘤坏死因子d;脂多糖;发热;
单核细胞;热限
·3·
the ofHSFlandIL-1
The between 13、
relationship expression
of infeverrabbits
TNF-理mRNA
monocytes
ABSTRACT
Introduction
the
Heatshock foundin is
factor(HSF)is eukaryotiecell,which
generally
all
issensitive
inthestructureandfunction.HSFl to kinds
conserved
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