利尿剂对自发性高血压大鼠细胞色素P450表氧化酶和血管紧张素Ⅱ1型受体基因表达的影响.pdfVIP

华中科技大学㈤济医学院碗上论文 中文摘要 代谢AA通过三种不同的氧化反应途径产生数种代谢产物：①通过表氧化生 1l，12．，和14，15一EET)；②丙烯基氧化生成 成四种环氧三烯酸(5,6一，8,9一， 压调节中起着重要作用，其表氧化酶代谢产物表氧化廿烷酸(EETs)可以通 过钙激活的钟通道调节血管张力同时，EETs可抑制大鼠近曲小管Na+一贮一ATP 酶活性，调节’肾脏离子转运和水出入量。经转基因研究已经证明CYP表氧化 酶可显著上调内皮一氧化氮合酶并可明显降低动物血压。利尿剂与EETs在离 子和水的运输、血管张力调节中的共性提示二者可能在血压调节中有内在联 系。 肾素．血管紧张索-醛固酮系统在高血压病发生发展中的作用已得到共识， 血管紧张素II与其受体ATt结合，收缩血管，刺激血管平滑肌细胞、心肌细胞 增殖，增加胶原形成，最终导致心室肥厚、重构、心肌纤维化。大量研究显示 利尿剂能明显减轻心肌肥厚，从而降低高血压病的并发症如脑卒中、左心衰竭 的发病率及死亡率。利尿剂与ATl之间是否存在一定的内在联系? 基于上述考虑，我们选择利尿剂中具有代表性制剂噻嗪利尿剂双氢克尿噻 和噻嗪类似药吲哒帕胺作为工具药。通过观察双氢克尿噻和吲哒帕胺对自发性 基因及血管紧张素II受体1(ATI)基因表达的影响，以期探讨利尿剂降压和 保护内脏器官的可能分子机制。 哒帕胺(O．625mg／kg)和等量去离子水灌胃，每日固定时间灌胃一次。用药后 每周监测SHR体重和动脉收缩压，每两周收集24小时尿量。四周后，通过过 量麻醉处死动物，并取心、肝、肾、主动脉等组织作以下研究。用电生理仪检 测胸主动脉环对血管活性物质的反应性：主要脏器固定并切片作形态学分析以 观察肾脏损伤情况和心血管重构情况：用Western印迹法和RT-PCR法分别从 蛋白质水平和RNA水平检测CYP2C11和ATl在心、肝、肾、血管等脏器的 华中科技大学同济医学院硕士论文 中文摘要 表达情况。 结果：用药一周后两种制尿剂缠血压开始下降，两周后与对照缀相比血压下降 5mmHg 噬糖黢缎是对照组的4,6售妒。，ot)。4溺嚣双氢克尿噻组犀鬟是对照缌戆2。8 倍(PO．01)，吲哒帕胺组是对照组的5．9倍(尸O．01)。而对照组由于未予治疗， 箕24小时葳鬃黑下洚趋势，旋示其鹜功能育溅遮趋势。魏主动躲环对鑫管活 性物质的反应性实验结果显示：两利尿荆组的胸主动脉环对乙酰胆碱引起的最 大舒张较对照缝明显掇高(P0．05)，对去译肾上腺素弓l起的最大收缩较对照缀 1)HE染 明显降低(PO．05)。组织切片HE染色以及天狼猩红染色结果鼹示： 色结聚遵示对照组肾小球数量明显减少，且大部分萎缩、硬化，附近的肾小管 出于缺擞．两萎缝、消失。双氢克嚣噻缀粒吲哒妫骚组援鹭可见大部分蟹小球结 构完整，肾小锗结构清晰。天狼猩红染色显示对照组肾脏皮质隧、髓质区大量 菠器淀袄，呈现纾维纯表现，戳氢竞羰毽缀霸霹}穗稽歉组胶嚣澎残甥鼹躐少。 提示利尿剂能明显改蓉动物的肾损害；2)心脏天狼猩红染色见对照组心肌细 脆腥丈，捧剐紊琵，阊璜增生，心噩珏缀织大量胶原沉积，而双氯克屎穗缝和晖} 哒帕胺组，iS,脏胶原形成明显减少；3)主动脉艟切片的天狼猩红染色分析显示 血管璧胶原沉板对照缀明显多于利尿剂组。擒示利尿剂治疗能改善心血管重 构。为了进一步探讨刹尿剂降躯的分子规制，本研究检测了CYP表氯化酶 噻组秘鸳|哒蟪骏组心、嚣、鹜、斑警黪CYP2C1l mRNA及蛋露震表达零平较 对照组明显升商，提示利尿剂的降压作用可能怒通过上调CYP450表氧化酶实 达水平。与对照组相比，双氢克尿噻组和吲哒帕胺组A!r：mRNA表达水平明显 降低，以碍f醚襁胺组降低更为箍著。这提示利稼剂可能通过下调AT。蒸因降低 血压、保护靶器官损豢的。 总之，本研究首次发现利尿剂在有效降低m压，明显改善动脉对m管活性