甲醛生殖毒性研究方法及进展.pdfVIP

http :// 1 甲醛生殖毒性的研究方法及进展 王博，刘丹丹，杨旭 华中师范大学生命科学学院环境科学实验室，湖北武汉（430079 ） 摘 要：甲醛的毒性研究一直是环境科学研究领域的热点，目前大量研究表明甲醛具有广泛 的生物毒性，而生殖毒性是其中不可忽视的一种。本文介绍了近年来甲醛生殖毒性的研究进 展，以及常用的研究方法。并对甲醛染毒雄性动物、雌性动物及胚胎幼仔等方面的生殖毒性 研究成果做一概述。 关键词：甲醛，生殖毒性，研究方法 1 引言 甲醛（HCHO ），又名蚁醛，是一种无色，易溶，有辛辣刺激气味的气体。甲醛是一种 重要的基本有机化工原料，用途很广，但对生存环境和人体健康危害较大。现有的研究表明， 甲醛具有广泛的生物学毒性，包括神经毒性，呼吸毒性，免疫毒性，心血管毒性等[1] 。2004 年世界卫生组织下属机构—国际癌症研究中心(IARC)领导的上作小组评估了甲醛致癌效应 的相关研究后，将甲醛确定为AI类物质，人类致癌物[2] 。同时，人们也一直关注着甲醛的生 殖毒性的研究进展。Rapport早在1946 年首次报道了甲醛具有致突变性，Auerbach1977 年在 果蝇的研究中肯定地得到甲醛对细胞遗传物质有影响的结论[3] 。Natarajar也报道了甲醛能够 诱导中国仓鼠卵细胞畸变率升高[4] 。近年来，由于人们对甲醛危害性的认识逐渐提高，甲醛 生殖毒性的研究也越来越受到关注。本文将对甲醛生殖毒性的研究方法及相关研究进展做一 综述。 2 系统介绍 2.1 甲醛生殖毒性的研究方法 近几十年来，随着遗传毒理学的发展，特别是分子生物学的飞速发展，推动了遗传毒理 学测试评价方法的不断改进。以下是几种常用的检测甲醛生殖毒性的研究方法。 2.1.1 HE 染色法 HE染色，就是苏木素一伊红染色。早期有研究用HE染色法观察小鼠睾丸组织的病理改 变，其结果表明甲醛能导致小鼠睾丸组织的病理改变以生殖细胞变性为主。2003 年中南大 学的王伟在其硕士学位论文 《甲醛对雌性小鼠生殖细胞影响的研究》中有报道，在染毒结束 的第1d，处死小鼠，取左侧卵巢，用10%福尔马林固定，石蜡包埋后连续切片，切片厚5um ， 经HE染色，光学显微镜下观察卵巢组织的病理变化。结果发现: 甲醛的低剂量组和对照组动 物的卵巢皮质中各级卵泡均正常。而甲醛的中剂量和高剂量组小鼠的原始卵泡、初级卵泡和 次级卵泡虽无明显改变，但部分成熟及闭锁卵泡有轻度变性，黄体细胞增大变空，局部区域 可见纤维组织增生，且尤以高剂量组更为明显。该结果表明甲醛可造成雌性小鼠卵巢病理组 织结构损伤，其病变的程度是随甲醛剂量的增加而更为显著[5] 。一张优质的HE切片按全国 统一评定标准为:切片完整、厚度 4~6um、厚薄均匀、无皱无刀痕、染色核浆分明，红蓝适 度、透明洁净、封裱美观。但是在实际工作中，某一环节稍不注意往往会出现这样那样的缺 点。其中严重影响诊断的便是组织结构和细胞核浆模糊不清、红蓝对比度差，即所谓的“灰 1本课题得到国家自然基金面上项目（No.）的资助。 -1- http :// 染现象”。它常波及整个切片甚至一批切片。因此，如何避免灰染现象的发生，是制作HE切 片中需特别要注意的问题[6] 。 2.1.2 生殖器官主要酶活力的评价 有关文献报道，SDH是精子的一种特异酶，主要分布在睾丸生精小管和精细胞的线粒体 中，在精子代谢过程中起重要作用。精子主要以果糖为供能原料，SDH把果糖转化为山梨醇， [7] 再转化为葡萄糖，进行正常代谢。当SDH缺乏时，将会影响精子的成熟、形态和数量等 。 因此采用紫外分光光度法测定血液和睾丸组织中的SDH活力，对反映甲醛的生殖毒性是可行 的方法。有