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实验 同位素示踪法在探究DNA复制方式中的应用(5年2考)
(2013上海卷,2012北京卷)
[要点突破]
探究DNA复制是半保留复制还是全保留复制,可用同位素标记技术和离心处理技术,根据复制后DNA分子在试管中的位置即可确定复制方式。具体过程及结果分析如下:
1.用放射性同位素标记大肠杆菌
(1)若用14N标记大肠杆菌(普通大肠杆菌无放射性),得到14N/14N的DNA分子,将该DNA分子离心处理,离心后位于试管的上部,即轻带(如下图1)。
(2)若用放射性同位素15N标记大肠杆菌,得到15N/15N的DNA分子,将该DNA分子离心处理,离心后位于试管的下部,即重带(如下图2)。
(3)若大肠杆菌的DNA分子中一条链被14N标记,另一条链被15N标记,离心处理后将会位于试管的中部,即中带(如下图3)。
2.追踪DNA的复制方式
(1)将亲代含14N的大肠杆菌转移到含15N的培养基上增殖一代。
(2)将亲代含15N的大肠杆菌转移到含14N的培养基上增殖一代。
(3)分别对上述培养得到的大肠杆菌离心处理。
3.结果分析
(1)若DNA的复制方式为全保留复制,则离心后出现如下图4所示,即重带和轻带。(该复制方式实际上是不存在的)
(2)若DNA的复制方式为半保留复制,则离心后出现如下图5所示,即全部为中带。
[典例透析]
【典例1】
科学家在研究DNA分子复制方式时进行了如图所示的实验研究(已知培养用的细菌大约每20 min分裂一次):
实验一:离心,
实验二:离心,
实验三:
(1)实验一和实验二的作用是________。
(2)从实验三的结果C、D可以看出DNA分子复制______(是/不是)半保留复制。
(3)如果实验三的结果都为E,则可判断DNA分子的复制方式________(是/不是)半保留复制。
(4)如果DNA分子的复制方式是半保留复制,与结果D相比,结果E密度带的数量和位置________________,放射性强度不同的是________带。
解析 (1)实验一和实验二分别表示14N和15N标记的DNA分子的离心结果,其作用是与后面的实验结果形成对照。(2)从实验三的结果C、D可以看出新形成的DNA分子中有的保留了原来DNA分子(15N/15N)中的一条链,可见DNA分子复制具有半保留复制的特点。(3)结果表明原来被15N标记的DNA分子的两条链没有分开。因此不是半保留复制。(4)假设原有DNA分子数目为n,结果D和结果E都有2n个DNA分子为15N/14N,结果D有2n个DNA分子为14N/14N,结果E有6n个DNA分子为14N/14N,所以与结果D相比,结果E密度带的数量和位置没有变化,放射性强度发生变化的是轻带。
答案 (1)对照作用 (2)是 (3)不是 (4)没有变化 轻
归纳小结
解答此类问题要先明确DNA全保留复制和半保留复制的区别,再利用逆推法,即假设为全保留复制或半保留复制,预期实验结果,再根据实验结果,正推出DNA复制方式。
【典例2】
取1个含有1对同源染色体的精原细胞,用15N标记细胞核中的DNA,然后放在含14N的培养基中培养,让其连续进行两次有丝分裂,形成4个细胞,这4个细胞中含15N的细胞个数可能是( )。
A.2 B.3 C.4 D.前三项都对
解析
关键点 信息解读 ① 含15N的DNA作模板,原料是含14N的脱氧核苷酸,合成的子链中含14N ② 该精原细胞进行的是有丝分裂,不要误认精原细胞进行减数分裂;且DNA分子复制2次,会产生15||14、14||14两种DNA分子 ③ 所求的是含15N的细胞个数,而不是DNA分子个数 答案 D
[常见失分探因]
(1)因受思维定势影响,误认为该过程进行的是减数分裂或求含15N的DNA分子数。
(2)对细胞分裂和DNA复制相结合的知识理解不透。此类问题可通过构建模型图解答,如下图:
这样来看,最后形成的4个子细胞有3种情况:第一种情况是4个细胞都是;第2种情况是2个细胞是,1个细胞是,1个细胞是;第3种情况是2个细胞是,另外2个细胞是。
[对点强化]
1.(2013·衡阳六校联考)细菌在含15N的培养基中繁殖数代后,细菌DNA的含氮碱基皆含有15N,然后再将其移入含14N的培养基中培养,抽取亲代及子代的DNA,离心分离,如图①~⑤为可能的结果,下列叙述错误的是( )。
A.子一代DNA应为② B.子二代DNA应为①
C.子三代DNA应为④ D.亲代的DNA应为⑤
解析 由题意可知,子一代的DNA应为全中(14N/15N),即图②;子二代DNA应为中(14N/15N)、轻(14N/14N),即图①;子三代DNA应为中(14N/15N)、
轻(14N/14N),即图③,而不是
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