60+Coγ射线诱导人不同细胞线粒体基因表达改变的研究.pdfVIP

¨g／L的PC预处理可以抑制Bcl．2表达下降。 目前已有的辐射防护剂中剂量减低系数(DRF)值大的，对机体毒副作用也比较大， 如WR2721对大动物起防护作用时所用剂量毒副作用大等限制了应用范围。对机体毒 副作用小的药物，其DRF值也比较小。PC作为一种植物提取成分易溶于溶剂，机体 吸收度高；在国外原花青素已经应用于食品、药品、美容保健品等领域，具有高效、 低毒、高生物利用率等特点，加之具有极强的清除自由基活性，具有符合作为理想辐 射防护剂的必要条件。本研究提示原花青素对细胞的毒副作用甚微，而对辐射损伤具 有较为明显的预防作用，可以降低辐射诱导的细胞凋亡，原花青素抗凋亡作用机制与 抑制Bcl-2表达下调有关。这些实验结果为寻找高效、低毒辐射防护先导化合物的研 究提供了新的思路，值得深入探讨。 【关键词】原花青素；辐射；损伤防护；AHH．1细胞；HIEC细胞 ∞CoY射线诱导人不同细胞线粒体基因表达改变的研究 割壹盔，．于卉，李玉文，封江彬，陆雪，高玲，赵骅，范莉，陈德清 中国疾病预畴控翩中心辐射叻护与核安全医学昕．1匕京100088 qjti．@nirp．cn 核与辐射的意外暴露以及恐怖事件发生时，有可能涉及大人群的辐射损伤，急需快 速、高通量的生物标志物，以应对人群辐射暴露情况下的生物剂量估算。有研究表明： 辐射诱导的基因表达水平改变有希望解决快速高通量的要求。线粒体基因组是细胞内唯 一的核外遗传物质，其编码的基因参与细胞氧化磷酸化和能量代谢，而且拷贝数高、无 组蛋白和非组蛋白的保护、缺乏有效的DNA修复系统，线粒体编码基因的表达有可能 成为辐射损伤的生物标志物。 目的：本研究以人永生化淋巴细胞株为主要研究对象，探索初筛得到的7种线粒体基因 I、COX b、COX (ND3、Cyt 1，射线照射 ．1R． 后在不同时间点的剂量效应关系，以期为探索放射敏感生物标志物和解决放射生物学领 域中快速剂量估算这一难题提供科学依据；同时，通过探索辐射对4种不同组织来源的 人正常细胞和肿瘤细胞中线粒体基因的影响，探索细胞辐射敏感性预测指标和线粒体基 因表达在肿瘤放射治疗中是否存在一定的应用前景(国家自然科学基金项。 方法：用0～18 Gy(剂量率为1Gy／min)的60Coy射线进行人淋巴细胞株的照射，照射 后分别培养4—72h。研究不同组织来源的人正常细胞和肿瘤细胞线粒体基因的表达水平 PCR方法定量检测线粒体 变化时，选择0、3和8Gy，照射后培养24h。利用Real．time 基因的表达水平；利用WesternBlot方法半定量检测线粒体基因的表达水平。 b基因转录水平的表达显 3～15Gy的范围内呈现良好的剂量效应关系；照射后24h，Cyt I表达显 著增强，并且在0~15Gy的范围内有一定的剂量效应关系；照射后12h，COX 著上调，在5Gy时达峰值，并且在0-5Gy的范围内有一定的剂量效应关系；照射后24h， 水平的表达显著上调，并且呈现良好的线性关系。特别是在48h和72h这两个时间点上， COX II基因表达水平与照射剂量线性相关：而在60Co丫射线照射后4～72h的五个时间点 上，ND3和ATPase8基因翻译水平的表达均无明显变化。 I、COXII和COXIIl3个基因的表达 上调，并且随剂量增加而表达增强。其中，COX 著改变。 结论：在转录水平上，60Co Y射线照射后24h为研究辐射诱导人淋巴细胞线粒体基因表 达改变的最佳时间点，7种线粒体基因均有各自不同的最佳诱导剂量。ND3基因在4h、 8h及24h均有一定的剂量效应关