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Racl量值水平与胃癌生物学行为关系的研究
高丹丹2续薇+
[摘要]目的探讨肿瘤转移相关基因Racl其与胃癌生物学行为的关系，为在临床实验
室开展肿瘤转移相关基因的联合检测奠定实验基础。方法采用实时荧光定量聚合酶链
fluorescence
反应(real—time quantitive
目的基因片段，构建重组质粒，建立RaclmRNA
RTFQ-PCR标准曲线，检测52例胃癌和
在胃癌组织均高于良性病变组织(P0．01)。在按胃癌患者性别、年龄、肿瘤大小分组
浸润深度、淋巴结转移、临床分期分组中，各组间比较差异有统计学意义(P0．05)。
结论实时荧光定量PCR方法检测RaclmRNA量值水平对胃良、恶性病变鉴别及评价胃癌
转移具有参考价值，可为多种肿瘤转移标志物联合检测评估胃癌转移奠定基础。
The iedResearchonRaclmRNA anditsRelationwith
Appl Quantification the
BehaviorofGastricCarcinomas
Biological
GAODan—danl，XUWeiH(1．TheC1inical ofthefirst of
Laboratory Jilin
Hospital
Universi
ty)
author：XUWeiEmai
Corresponding l：墨坠塑金iQ21Q堡墨in垒：￡Qe
Racl的量值水平，分析其与胃癌生物学行为的关系，分析如下：
1．材料和方法
1．1材料
1．1．1主要材料和试剂来源胃癌组织标本由吉林大学第一医院和第二医院普外
科术中留取。Trizol
公司产品，01igo(dT)、Rnasin、Ex
I、XhoI、DNAMarker
2作者单位：吉林大学第一医院检验科
通讯作者：续薇xuwei0210@sina_com
·386-
PCRMaster
a由吉林大学第一医院中心实验室提供，质粒DNA小量提取试剂盒及DNA凝胶回收试剂
盒为Axygen公司产品。引物、荧光探针由上海基康生物技术有限公司合成。测序由天
根生化科技(北京)有限公司完成。
PCR扩增仪，美国BACKMAN
1．1．2主要仪器美国PE2400 DU-640紫外分光光度计，
CosmoBio
德国AERMLEZ383K低温台式离心机，日本 CoLTD水平凝胶电泳槽，美国
STRATAGENE
MX3000P定量PCR扩增仪。
1．2方法
1．2．1
浓度和纯度，进行逆转录，琼脂糖凝胶电泳进行分析。结果见图1。
1．2．2 ul进行
酶切，纯化回收酶切产物进行连接构建重组质粒。用氯化钙法制备感受态大肠杆菌DH5
a，将重组质粒转化到大肠杆菌，提取重组质粒进行鉴定。鉴定电泳结果见图2。
1．2．3构建RaclmRNARTFQ-PCR标准曲线用紫外分光光度计测重组质粒OD：∞=
X50u u
0．0336，重组质粒的浓度：0．0336g／ml×200(稀释倍数)=336g／ml。重组质
X
粒的拷浓度=重组质粒的质量浓度×6．02×1023／分子量=
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