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桑黄中β-葡聚糖快速荧光光谱检测方法研究.doc
桑黄中β-葡聚糖快速荧光光谱检测方法研究
韩素芳1,贺亮2,刘亚群1,程俊文2,杨柳3*
(1.浙江省林业科学研究院,分析测试中心,浙江杭州 310023)
(2.浙江省林业科学研究院,生物技术研究所,浙江杭州 310023)
(3.浙江省林产品质量监督检验站,浙江杭州 310023)
摘 要:建立了以海带多糖为标准样品,与苯胺蓝特异结合,荧光光谱法测定桑黄多糖中β-D-葡聚糖含量的准确、经济、快速的检测方法。对96孔板、标准样品、回收率、精密度及稳定性进行考察。结果表明:在激发波长398nm,发射波长503nm测试条件下,海带多糖在0-15μg·mL-1浓度范围内与荧光强度表现良好的线性关系,桑黄粗多糖中β-D-葡聚糖含量测定结果为19.86%,平均回收率为98.39%。并对市售酵母葡聚糖粉中β-葡聚糖含量进行了测定,含量为82.29%,与产品标识含量相符。
关键词:桑黄 β-葡聚糖 荧光光谱
Quickly Determination of β-glucan from Phellinus by Fluorometry Method
Han Sufang1, He Liang2*, Liu Yaqun1, Cheng Junwen2, Yang Liu3
(1.Zhejiang Forestry Academy, analysis and test center, Hangzhou, Zhejiang, 310023)
(2.Zhejiang Forestry Academy, Institute of Biotechnology, Hangzhou, Zhejiang, 310023)
(3.Zhejiang Forestry Product Testing Station, Hangzhou, Zhejiang, 310023)
Abstract: Based on the fluorecent property of specific integration of aniline blue dye and standard laminarin, β-glucan fluorescent determination method for quickly determination of β-glucan from Phellinus was developped. The 96 hole state, standard sample, recovery, precision and stability were investigated. With an excitation maximum wavelength of 398nm and an emission maximum wavelength of 503nm, the standard curve had a good linearity with a concentration range of 0-15μg·mL-1. The content of β-glucan in Phellinus polysaccharid is 19.86%.And the recovery is 98.39%. The commercially available yeast beta glucan content in dextran powder were determined by the method, the content of 82.29%, consistent with the labeling content of the products.
Key Words: Phellinus, β-glucan,Fluorometry)[1,2]
桑黄是一种珍贵的多年生大型药用木腐真菌,被称为“森林黄金”。桑黄菌提取物在抑制癌细胞转移和防止癌症手术后复发等的临床应用中具有显著效果,是目前国际公认的生物治癌药剂中效率最高的一种药用真菌,桑黄已经成为国内外医药制剂与功能食品研究开发的热点。桑黄多糖是桑黄活性成分之一[3],近年越来越受到人们的重视。其中β-葡聚糖是抗癌作用的主要成分。 桑黄中β-葡聚糖的含量是巴西蘑菇中的两倍。[4,5]
目前β-葡聚糖含量的检测方法主要有三类:一是酶法,通过降解成单糖或寡糖来检测;二是蛋白特异识别的方法;三是通过无机化学的方法,如苯酚-硫酸法等。而荧光法原理是利用β-葡聚糖与荧光剂结合并增强荧光剂的荧光强度。Yuan等人以curdlan多糖为标准品,利用葡聚糖与苯胺蓝的特异结合,进行了一些食品中β-葡聚糖含量的测定。[6]杨开等人以酵母β-1,3/1,6葡聚糖为标准品,对灰树花、巴西蘑菇等食药用菌中β-葡聚糖含量进行了测定研究。[7
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