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* * 专题2 微生物培养与应用专题整合 常见的消毒灭菌方法归纳 方　法 操作过程 应用范围 煮沸 消毒法 100 ℃煮沸5～6 min 日常生活中广泛使用 巴氏 消毒法 在70～75 ℃煮30 min或在80 ℃煮15 min 牛奶、啤酒、果酒和酱油等不宜进行高温消毒的液体 化学药物 消毒法 用体积分数为70%～75%的乙醇、碘酒涂抹，来苏水喷洒等 用于皮肤、伤口、动植物组织表面消毒，空气、手术器械、塑料或玻璃器皿等 紫外线 消毒法 30 W紫外灯照射30 min 接种室空间消毒 灼烧 灭菌法 酒精灯火焰灼烧 微生物接种工具如接种环、接种针或其他金属用具等，接种过程中试管口或锥形瓶口等 干热 灭菌法 干热灭菌箱160～170 ℃加热1～2 h 玻璃器皿(如吸管、培养皿等)、金属用具等凡不适宜用其他方法灭菌而又能耐高温的物品 高压蒸 汽灭菌 法　　 100 kPa、121 ℃维持15～30 min 培养基及多种器材、物品 尿素分解菌和纤维素分解菌的分离与 鉴定比较 　　项目 内容　　 尿素分解菌 纤维素分解菌 条件 尿素为唯一氮源 纤维素为唯一碳源 鉴定方法 及现象 培养基中加入酚红指示剂，变红色 在培养基上应用刚果红染色 法，出现透明圈 鉴定原理 细菌等微生物生成脲酶，使尿素中肽键断裂产生NH3，使pH升高，加入酚红变红色 微生物产生纤维素酶，将纤维素分解为纤维二糖或葡萄糖，使纤维素—刚果红复合物降解而出现透明圈 步骤差异 土壤取样→制备培养基→样品梯度稀释→涂布平板→培养观察 土壤取样→制备培养基→选择培养→梯度稀释→涂布培养→刚果红染色→挑取菌落→进一步鉴定 自养微生物和异养微生物的营养比较 微生物 营养型 碳源 氮源 生长因子 举例 自养型 微生物 CO2、NaHCO3 NH3、铵盐硝酸盐等 一般需要不 硝化细菌 异养型 微生物 糖类、脂肪酸等 铵盐、硝酸 盐、蛋白质等 有些种类需要 乳酸菌 【典例1】 下表是微生物培养基的成分。下列有关说法错误的是 (　　)。 A.此培养基可用来培养自养型生物 B．此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源 C．若除去①，此培养基可培养圆褐固氮菌 D．培养基若加入氨基酸，则它可充当碳源、氮源和生长因子 编号 ① ② ③ ④ ⑤ 成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O 含量/g 0.4 4.0 0.5 0.5 100 mL 解析　由题知，该培养基成分中含有水、无机盐、氮源，但不含含碳有机物，可用来培养自养型微生物，选项A、B均对；圆褐固氮菌同化类型为异养型，培养基中必须含含碳有机物，所以该培养基不能用来培养圆褐固氮菌，C错。 答案　C 区分选择培养基与鉴别培养基 概念 用途 实例 选择 培养 基 培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长 培养、分离出特定的微生物 培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉 素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐 鉴别 培养 基 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生物 用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽) 【典例2】 (2011·郑州质检)请回答下列与大肠杆菌有关的问题。 (1)从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于____________，它的同化作用类型是____________。 (2)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。 成分 含量/g 蛋白胨 10.0 乳糖 5.0 蔗糖 5.0 K2HPO4 2.0 显色剂 0.2 琼脂 12.0 溶质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL 根据用途划分该培养基属于__________(选择、鉴别)培养基。该培养基中的碳源是____________。 (3)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________(消毒、灭菌)，操作者的双手需要进行清洗和____________。静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能______________。通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的________。培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是___________________。若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。 解析　(1)从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于分解者，其同化作用类型是异养型。(2)由于该培养基中含有显色剂，属于鉴别培养基；该培养基中的碳源是乳糖、蔗糖、蛋白胨。(3)注意灭菌和消毒的区别，在微生物