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不同植物生长促进玉米种子萌发和幼苗生长发育的根际细菌的影1.doc
不同的植物生长促生菌对玉米种子的萌发和幼苗生长发育的影响
摘要
我们的研究旨在评估3种植物生长促生菌在实验室和温室条件下以单独或组合的形式对玉米种子的影响。用浓度为108 CFU /毫升单一或者是混合的菌液处理种子。接种过程并没有按照控制变量的原则。用荧光假单胞菌和假单胞菌组合得到了最高发芽率。这种组合也记录最好的活力指数,植物周围叶片数和叶面积。经过固氮螺菌处理过的种子所长成的植株具有最大高度。经过固氮螺菌处理过后植株具有最高的地下干物质率与对照相比增加了56%。同时用荧光假单胞菌和假单胞菌组合处理得到的地上干物质率提高了59.11%。最后,用荧光假单胞菌和假单胞菌组合处理的种子具有最高的地上生物量,而被固氮螺菌处理过的种子具有最高的地下生物量。这些结果表明,植物生长促生菌的特殊组合被认为能够在促进玉米种子萌发,生物量和作物产量等方面取代生物肥料。
关键词:固氮螺菌;假单胞菌;PGPR,biofertlization;玉米种子;萌发;温室
1。简介
植物生长促生菌(PGPR)是一类能够促进生根和提高植物的生长速率和产量的细菌。[ 1 ]。它们促进植物生长的机制尚不明确,但它们可以被分为四类:生物肥料(液态的无机磷酸盐,共生固氮)[ 2,3 ],光刺激类(能产生激素)[ 4 ],根际修复类(降解有机污染物)[ 5 ]和生物农药类(生产铁载体的合成研究,抗生素,酶和/或杀真菌化合物)[ 6-8 ]。
目前,植物生长促生菌(PGPR)是生物农业的主要资产。作为环境生物技术的一种方式,用以缩小化肥剂量的减少对作物产量的影响。它也可以作为农业[9-11]集成管理策略的组成部分对农业进行评估。假单胞菌是第一个被发现的植物生长促生菌。在加利福尼亚爱达荷州,研究发现用荧光假单胞菌和假单胞菌液处理的马铃薯产量由14%明显提高到33%。这也已表明荧光假单胞菌和假单胞菌菌株能够促进油菜、小麦和马铃薯[14,15]根和芽伸长。固氮螺菌作为一种突出的植物生长促生菌,在不同的气候条件下作为不同作物的孕育剂能够显著提高作物产量。就玉米来说,欧洲大都使用固氮螺菌CRT1,而在墨西哥(一个在田间接种领先的国家)荧光假单胞菌uap-154 和cfn-535得到广泛使用。一些研究已经表明植物生长促生菌对植物的影响,但很少有涉及到通过影响种子发育进而影响植株生长。一些PGPR的组合的影响尚未得到很好的研究。我们推测,植物生长促生菌通过与不同的代谢途径结合(N2固定,P均化,生产激素,和抗菌剂,等)进而改善作物的生长环境。以同样的方式,我们可以推测3种植物生长促生菌在实验室和温室条件下以单独或组合的形式对玉米种子的影响。
2。材料和方法
2.1。材料
使用的菌种包括固氮螺菌,荧光假单胞菌和假单胞菌。种子经过85 - 90天的周期的多样化处理称之为evdt 97个STR C1s ,用以在温室试验的土壤是一个中深红色的没有遭受破坏有机土壤。
2.2。PGPR菌剂的制备
用PGPR进行分离和鉴定[ 22 ]。不使用时,细菌种群用10%的甘油保存在?20°C穆勒欣顿肉汤中。采用改性后的方法制备[ 23 ] PGPR悬浮液。荧光假单胞菌和假单胞菌需要在30°C的营养液培养中培养48小时,而固氮螺菌则需要在37°C的营养液培养中培养48小时。经过两天的人工培养后,再对其以1000转每分钟的速度进行离心。菌体悬浮在离心后营养液的上层。再用分光光度计将菌剂的浓度调整到1×108 CFU /毫升。对于以两种或三种植物生长促生菌进行1:1混合处理。
2.3。种子接种PGPR
用0.024%的次氯酸钠消毒和无菌蒸馏水彻底清洗玉米种子表面2分钟[ 24 ]。用浓度为1×108 CFU /毫升的不同植物生长促生菌悬浮液处理种子[ 25 ]30分钟。
2.4。实验设计
CTL =控制(无菌);Azo:用固氮螺菌进行处理;P1:用荧光假单胞菌进行处理;P3:用假单胞菌进行处理;Azop1:固氮螺菌与荧光假单胞菌以相同比例混合后进行处理Azop3:固氮螺菌与假单胞菌以相同的比例后进行处理;p1p3:用荧光假单胞菌与假单胞菌以相同比例混合后进行处理;Azop1p3:在相同的比例与固氮螺菌与荧光假单胞菌,假单细胞菌在相同的比例(1:1:1)混合后处理。
2.5。种子体外萌发
每二十个玉米种子用PGPR接种后,等距地在无菌培养皿中进行培养(11.8厘米/长宽)(图1)。
2.6。PGPR对玉米生长的影响
2.6.1。土壤的化学特性
用十克的土壤悬浮和25毫升蒸馏水确定土壤pH值[ 26 ]。磷的吸收量则可在660 nm处通过颜色测定 [ 27 ]的颜色的方法决定的,而可交换阳离子(Ca,Mg和K)则用先前描述的醋酸铵法测定[ 28 ]。通过[ 29 ]的方法,对有机碳的评估包括氧化铬酸钾与土壤有机
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