巯基吡啶配基液相色谱固定相的制备及其对质粒的快速纯化01523.pdfVIP

2007年 11月 色 谱 V o l. 25 N o. 6 N ovem b e r 2007 C h in ese J ou rn a l of C h rom a tog raph y 820 ～824 巯基吡啶配基液相色谱固定相的制备及其对质粒的快速纯化 李 　渊 , 　窦国胜 (天津工业大学材料科学与化学工程学院, 天津 300 130) 摘要 :在基因治疗中,质粒是一种常用的非病毒型载体 。由于 目前市场上对质粒的需求量很大 , 因此有必要开发大 规模的质粒制备技术 。该文以双孔型流通色谱介质为基质 , 以巯基吡啶为配基 , 制得了液相色谱固定相 , 并考察了 其对质粒 DNA 的纯化效果 , 分析了分离机理 。结果表明:该分离介质对质粒的纯化是基于疏水作用; 当上样量为 10 m L (质粒质量浓度为 030 m g /m L ) 、流速高达 4 m L /m in时, 质粒仍然能以 100% 的收率实现纯化 , 其纯度为 100%。该色谱介质对 RN A 的柱容量高达 22 m g /m L 。 关键词 :巯基吡啶配基; 双孔型流通色谱固定相; 质粒; 快速纯化 中图分类号 : O 658　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 100087 13 ( 2007)　栏 目类别 :研究论文 P r ep a r a t io n o f B ip o r o u s P o lym e r ic M ic r o sp h e r e s C o u p le d w it h M e r c ap t op y r id in e a n d I t s A p p l ic a t io n in R ap id P u r if ic a t io n o f P la sm id DN A L I Yu an , DOU G u o sh en g ( Sch oo l of M a ter ia l Sc i en ce a n d Ch em ica l E n g in eer in g, T ia n j in P o ly tech n ic U n iver s i ty , T ia n j in 300130, Ch in a ) A b s t r a c t : P la sm id is a k in d o f p op u la r n on v ira l ve c to r in gen e th e rap y. To p ro du c e la rge qu an t it ie s o f p la sm id, an e ff ic ien t la rge sc a le p u r if ic a t ion p ro c e s s n e e d s to b e d eve lop e d. In gen e r a l, liqu id ch rom a to g rap h y is th e m o s t im p o r tan t to o l fo r th e an a ly t ic a l an d p rep a ra t ive sep a ra t ion o f p la sm id DN A. In th is s tu dy, b ip o rou s p o lym e r ic m ic ro sp h e re s c oup le d w ith m e rc ap top y r id in e w e