黄芩素分子印迹整体柱的制备研究论文.pdfVIP

2013年《药物分析杂志》优秀论文评选交流会论文集 一173一 中含有1个羧基，活化羧基的方法主要有混合酸酐法、活性酯法及碳二亚胺法。其中活性酯法具有交叉反应 少、副产物少、抗体特异性强等优点¨81。因此本实验采用NHS活性酯法，首先将BAL的羧基活化，即在缩合 脱水剂DCC作用下，生成黄芩苷的NHS活性酯；然后此活化酯与载体蛋白BSA的氨基反应形成新的酰胺 键，构建获得BAL与BSA的完全抗原BAL—BSA。 目前对于合成的完全抗原的鉴定方法有很多，如紫外光谱扫描法¨9。、同位素标记的半抗原示踪法Ⅲo、 凝胶电泳【1 价。经红外吸收光谱图谱分析，表明BAL的羧基基团与BSA的游离氨基通过形成新的酰胺键而偶联形成 BAL—BSA复合物。 半抗原与载体的偶联比是影响完全抗原免疫原性的重要因素，进而决定着针对半抗原的高特异性、高效 价抗体的制备。但是同种半抗原与不同载体的偶联存在着最佳的分子结合比瞄J，有文献报道连接到BSA 上的半抗原数以l一30为宜。低偶联比的完全抗原可获得高亲和力的抗体，但引起的免疫反应较慢；高偶联 比可以增强免疫反应的强度和效价，但会影响抗体的活性和特异性，并且产生的抗体亲和性较低Ⅲ埘J。本 法检测结果显示，采用该完全抗原免疫家兔后获得了高效价