海藻糖生产菌株筛选过程中产物鉴定研究.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 ’( )! 1’ ) # 年 月 $%% $ !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,-./-0 $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 海藻糖生产菌株筛选过程中产物鉴定的研究 荣绍丰 张海平 杨 静 段作营 毛忠贵 （江南大学生物工程学院 无锡 $#!%3 ） 摘 要：在海藻糖生产菌的筛选过程中，微生物胞内酶转化淀粉生成的产物复杂，将产物逐一 纯化是非常烦琐的，但又必须确证产物中是否含有海藻糖。本文将薄层层析、高效液相电喷 雾电离质谱联用及核磁共振等分析手段综合应用于海藻糖生产菌株的筛选，在酶反应产物不 必被纯化的前提下，准确、快捷地鉴定了酶反应产物中的未知糖组分，最终证明食尼古丁节杆 菌（ ） 利用淀粉或麦芽寡糖的酶反应产物中含有海藻糖。该方法 !#$%’(#) *+(%#+*%,%-. B62A 在筛选海藻糖及其它功能性葡二糖生产菌株时较为严密。 关键词：海藻糖，薄层层析，高效液相 电喷雾电离质谱联用，核磁共振 6 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） C22 D2 E %%%#63$%2 $%% %#6%#%!6%A 海藻糖（ ， ）是由两个吡喃环葡萄糖分子 F-+/(’;+ 6B6:(.?’;G0-/9’;0(6 6B6:(.?’G0-/9’;8H+ ! ! 以 ， ，键连接而成的非还原性双糖。它广泛分布于微生物（尤其是极端微生物）和动 6# # !! 植物中。最新研究表明海藻糖对生物染色体、大分子蛋白、生物膜等具有非特异性保护作 ［ ］ 用# I 。目前海藻糖广泛应用于食品工业、农业、医药工业及分子生物学领域。 自然界中由两个吡喃环葡萄糖分子以 葡萄糖苷键连接而成的双糖有 种，分别为 6 @ ! 海藻糖（ ，键葡萄糖苷键）、曲二糖（ ，键葡萄糖苷键）、黑曲二糖（ ，键葡萄糖苷 6# # 6# $ 6# ! ! ! 键）、麦芽糖（ ，键葡萄糖苷键）和异麦芽糖（ ，键葡萄糖苷键）。海藻糖又存在 种 6# ! 6# 3 ! ! 空间异构体，分别为 ，海藻糖（， ，键）、，海藻糖（， ，键，又名新海藻糖）和 6 6# # 6 6# # !! !! ! ! ，海藻糖（， ，键，又名异海藻糖）。另外与海藻糖具有相同分子量的双糖还有很多 6 6# # 种，如异麦芽糖、蔗糖、乳糖等。实际上无论是采用薄层层析色谱（ ）还是高效液相色 FJK 谱（ ）进行糖分析，这些与海藻糖结构、性质