解耦联蛋白2在血管紧张素Ⅱ致线粒体活性氧生成中作用.pdfVIP

· 940 · 中华高血压杂志2OlO年 1O月第 18卷第 1O期 ChinJHypertens，October2010，Vo1．18No．10 论著 解耦联蛋白2在血管紧张素 Ⅱ致线粒体 活性氧生成中的作用 李萍，尹康 ，罗时珂，程晓曙 【摘要】 目的 观察血管紧张素 1I(Ang1I)对 内皮细胞线粒体膜 电位 (MMP)和反应性氧族 (ROS)的影响，探 讨解耦联蛋 白2(UCP2)在该过程中的作用。方法 整个研究分 3个部分：①观察Ang Ⅱ对 内皮细胞线粒体 MMP 和 ROS产生的影响。分别用不同浓度 AngII(O．1、1、10~mol／L)干预体外原代培养并传代 3～4代的人脐静脉 内 皮细胞 (HUVEC)24h，用流式细胞仪检测 MMP和 ROS的生成 ，逆转录聚合酶链式反应 (RT—PCR)定量 UCP2 mRNA的表达 ；②分别用 UCP2反义寡核苷酸和外源性解耦联剂羰基氰化物间氯苯腙 (CICCP)下调或上调 UCP2， 观察 UCP2对 内皮细胞线粒体 ROS及 MMP的影响；③观察外源性氧化剂过氧化氢对 UCP2mRNA表达 的影响。 结果 AngII呈浓度依赖性增加 HUVEC中R0s及 MMP的水平及 UCP2的表达 ；和对照组 比较 ，UCP2反义寡 核苷酸干预 24h，可使 内皮细胞 R0S和MMP明显升高(分别从 90．0±2．5增加至 165．3±2．2和从 125．0±4．6增 加至 205．1±5．8，均 PO．O1)；而外源性解耦联剂 CLCCP干预则使 R0s和 MMP明显下降 (分别从 210．3±5．2 降至 156．2±3．5和从 307．2士4．1降至 220．0±9．2，均 P0．01)。过氧化氢能明显增加 UCP2mRNA的表达 (P0．01)。结论 AnglI可增加线粒体 R0s的产生 ，同时 UCP2表达呈保护性上调；提示氧化应激过程 中， UCP2的作用可能是细胞重要的抗氧化机制。 【关键词】 血管紧张素 U； 解耦联蛋 白2； 反应性氧族 EffectofUncoupling Protein-2 on Angioteusin Ⅱ Induced ReactiveOxygen SpeciesGeneration in Mitochondria LIPing，YIN Kang，LUOShi—ke，CHENGXiao—shu． DepartmentofCardiovascularMedicine，theSecondAj— filiatedHospitalofNanchangUniversity，NanchangJiangxi330006，China [Abstract] Objective Tostudytheeffectsofangiotensin Ⅱ (Ang II)onendothelialcellmitochondriamem— brahepotential(MMP)，reactiveoxygenspecies(ROS)production。andtherolesofuncouplingprotein一2 (UCP2)． Methods Thisworkincludesthreeparts：1)InvestigatingtheimpactofAng 1IonMMP andtheproductionof ROS． Humanumbilicalveinendothelialcells(HUVEC)at3— 4passageswereculturedinvitrowithcontrol (DMEM，orAng Ⅱat0．1，1and10~mol／Lrespectivelyfor24hours． IntracellularROSandMMPweredetected byflowcytometry． UCP2mRNAexpressionswerequa