动物细胞培养和核移植技术(新课).pptVIP

3.动物细胞培养条件： 1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。） 3、温度和PH 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4 4、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 4.动物细胞培养应用 大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体） 获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据 小结： 动物细胞工程 动物细胞工程的技术手段 动物细胞工程技术的基础 动物细胞培养 常用技术手段 动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞融合 生产单克隆抗体 动物细胞核移植 一、动物细胞培养过程 阅读“动物细胞培养过程”并思考： 1、动物细胞培养的概念是什么？该技术实施的原理是什么？ 特点是什么？ 2、为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞分散？ 3、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间的物质主要是什么？用胃蛋白酶可以吗？ 4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？ 5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ 6、简述动物细胞培养的操作过程 从动物机体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 一、动物细胞培养 1 、动物细胞培养的概念 2.动物细胞培养的原理： 细胞增殖 下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答： 1）容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自______________________。 （2）容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是 ，然后用 酶处理，这是为了使细胞分散开来，这样做的 目的是 。 动物胚胎或幼龄动物 剪碎 胰蛋白 防止细胞间接触抑制现象，使细胞与培养液充分接触，便于培养 （3）培养首先在B瓶中进行，瓶中的培养基特有成分有 __________。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这是培养到 第 代，到这时的培养称为__ 。 （4）为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用 处理，然后配置成 ，再分装。 动物血清 10 原代培养 胰蛋白酶 细胞悬液 定义：人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。 胰蛋白酶处理 取出组织 胚胎或幼龄动物器官组织 剪碎 单个细胞 细胞悬液 转入培养瓶内培养 （贴壁生长长成单层细胞。有接触抑制现象）。 ①原代培养 过程 图示 原代 培养 细胞悬液 CO2培养箱 细胞贴壁过程 ■细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 ■培养瓶或培养皿壁要求： 表面光滑、无毒、易于贴附。 ■当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 接触抑制 原代培养： 传代培养： 原代培养与传代培养的区别 分装之前，10代以前 分装后继续培养，10代以后 保证细胞顺利的生长增殖 动物细胞培养液的主要成分： 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。 与植物培养基相比其特点是： （1）液体培养基 （2）含有动物血清 动物体细胞大都生活在液体的环境 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ 1、较植物组培培养基有何独特之处？ 独特 1、液体培养基 之处 2、成分中有动物血清等 这些组织或器官上的细胞分裂能力强 3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 防止细胞间接触抑制现象， 使细胞与培养液更充分接触 4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，而不能发育成个体 5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ 能 6、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近 二.动物细胞核移植技术和克隆动物 将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）。 分 类 胚胎细胞核移植： 体细胞核移植： 细胞分化程度低，恢复全能性容易； 细胞分化程度高，恢复全能性不容易 1.动物细胞核移植概念： 2.体细胞核移植的过程： （难度高） 去 核 注 核 重组细胞