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细菌鞭毛染色是医学微生物学实验和临床细菌学诊断中一项常用的.doc
肺炎链球菌荚膜染色法的改良研究
蒋莲秀,黄光玲,何义,吴丹,钟毓娟*
(桂林医学院基础医学实验教学中心,广西桂林 541004)
[摘要]目的:探索一种新的细菌荚膜改良染色法,提高细菌荚膜染色质量。方法:涂片用A液60℃水蒸汽蒸染、B液媒染、C液固定脱色、D液复染。结果:改良法菌体紫红色,背景浅蓝,荚膜无色透明,涂片背景干净,菌体、荚膜、背景三者对比明显。结论:改良法荚膜染色荚膜清晰,菌体与荚膜之间对比明显,方法简便,重复性好,便于批量教学标本制作。
[关键词]荚膜;染色法;改良
Abstract :[objective ]Explore new bacteria capsule staining method, improve the bacteria capsular dyeing quality。[ methods] Smear with initial dye solution 600 c water bath, iodic fluid mordant, 20% methanol fixed decoloring, lactic acid phenol medan redyeing .[ result] Improved method thalli amaranth, background light blue, capsular colorless transparent, smear background clean, bacteria, capsule, background three apparent contrast, dyeing effect is good. [conclusion] Improved method capsular dyeing k clear, bacteria and capsular between apparent contrast, the method is simple, reproducible and easier to master.
Keywords: capsular; Staining method; Improved dyeing method
荚膜是某些细菌的特殊结构,具有黏附、抗吞噬作用,与细菌的致病性有关,在细菌的鉴定中有重要意义。荚膜的形成主要受遗传因素决定,但也与环境条件有关,如在动物体内和营养丰富(含大量血清和糖)的培养基中容易形成,而在普通培养基上极易消失[1]。细菌的荚膜染色在微生物学教学实验和某些细菌学诊断中是一种常用的也是较难掌握的染色技术。目前常用的染色法有Hiss、Muir,Olt、湿(干)墨水负染法以及改良染色法等,但这些方法仍然存在染色繁琐、效果不理想等缺点。我们在传统的染色技术的基础上经过多次实验,探讨建立一种新的肺炎球菌荚膜染色法。
1 材料和方法
1.1 肺炎链球菌(本室保存菌种)。
1.2 实验动物 小白鼠(本院动物中心清洁级)。
1.3 荚膜染色液
A液(鞭毛染色液):甲液为5%石炭酸5份,20%饱和钾明矾溶液2份,20%鞣酸2份混合,乙液为碱性复红酒精饱和液1份,甲、乙两液混合过滤后第三天使用;B液:碘液(革兰染色第二液);C液:20%甲醇;D液:乳酸酚棉兰(石炭酸20g,乳酸20mL,甘油40mL,棉蓝0.05g,蒸馏水20mL
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