植物组织培养 绪论、第一章、第二章大纲.docVIP

一、植物组织培养的广义含义(tissue culture) 在无菌条件下，将离体植物的器官、组织、细胞或原生质体在人工配制的培养基上，并给予适当的培养条件使其长成完整植株的过程或生产具有经济价值的其他产品的技术。 也称离体培养（Invitro culture） 。 二、此定义内涵： 1、无菌条件（asepsis)：外植体、培养基、培养容器、接种工具、操作环境、培养环境等。 2、外植体（explant） ： 健康植株的特定部位或组织，如根、茎、叶、花、果实、胚珠、花药和花粉等，选择用于组织培养的起始材料，称之为外植体。包括营养器官、生殖器官、组织、细胞等。 3、培养基（culture medium)：是植物组织培养的重要基质， 它提供植物生长所需的营养物质。人工配制，成分确定。 4、组培的理论基础：植物细胞的全能性（totipotent）。 5、激素 ：调控培养物的状态和发育方向，实现不同的实验目的。 6、封闭培养 ：通过封口材料实现气体交换。 7、培养条件（ culture condiction）:人为控制。 *植物组织培养的狭义含义 指对植物体所有组织如分生组织、胚乳组织、薄壁组织、花药组织、愈伤组织的培养。 本课程所涉及的组织培养若无特殊说明均指广义含义。 三、植物组织培养的四要素 （1）无菌 （2）培养材料： ①器官：根、茎、叶、花、果实 ②组织：花药组织、胚乳、皮层等 ③细胞：体细胞（2n）、生殖细胞（n） ④原生质体 （3）培养基 （4）培养条件：温度、光照、湿度 等 四、与组培有关的术语及理论 1、植物细胞全能性（totipotent)： 植物细胞具有该植物体全部遗传的可能性，在一定条件下具有发育成完整植物体的潜在能力。 原理：植物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，植物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 潜在全能性的原因： 基因表达的选择性 。 科学研究表明，处于离体状态的植物活细胞，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。人工条件下实现的这一过程，就是植物组织培养。 实现全能性的条件 1. 离体条件 2. 给予适当的条件，如激素等。 全能性的相对性和绝对性 差异：（1）植物细胞强于动物细胞; （2）受精卵的全能性最高 ; （3）受精卵分化后的细胞中，体细胞的全能性比生殖细胞的低。 全能性表现强弱: 按细胞类型： 营养生长中心形成层薄壁细胞厚壁细胞特化细胞 按细胞所处的组织： 顶端分生组织居间分生组织侧生分生组织（形成层和木栓层） 薄壁组织厚角组织输导组织厚壁组织 2、外植体（explant)： 从健康植株的特定部位或组织，如根、茎、叶、花、果实、胚珠、花药和花粉等，选择用于组织培养的起始材料 ，称之为外植体。供离体培养用的植物器官统称外植体。 3、愈伤组织（callus)：在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。 4、分化(differentiation)：具有分裂能力的分生细胞停止分裂，形成具有各种特殊构造和机能的细胞组织和器官的发育过程。 5、脱分化（去分化） (dedifferentiation):已经分化的细胞在一定因素的作用下，改变原来的发展方向，重新恢复分裂能力的过程。 6、再分化（re differentiation)：愈伤组织在合适的条件下，重新分化形成具有各种特殊功能或结构的器官和组织的过程。 脱分化 １、概念 脱分化的机理目前尚未得到合理的清楚的阐明 ２、影响因素 Ａ、损伤Ｂ、生长调节剂Ｃ、光照Ｄ、细胞位置Ｅ、植物生理状态Ｆ、植物种类差异 再分化 １、概念 目前还无法使所有植物的所有活细胞再分化成完整植株 ２、原因 Ａ、植物种类再分化的能力不同 Ｂ、再分化的条件未完全掌握 植物的再生性（细胞全能性的实现的过程） 植物组织培养 7、胚状体（embryoid）：非合子细胞形成的胚状结构，如兰花的原球茎。 8、胚胎发生：培养物通过与正常的受精卵发育相似方式形成胚状体的过程。 （经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期） 9、无性系(clone)：即无性繁殖系，克隆。由同一个外植体培养而得到的一群在遗传上基本保持一致的细胞组织或植株。 植物的形态建成 一、愈伤组织诱导与器官分化 （一）诱导、形成条件 １、离体 ２、激素 愈伤组织的形成和形态发生 1、形成过程 ①启动期（诱导期）：细胞准备进行分裂的时期。长短因不同植物而不同，如与植物种类、外植体的生理状态、外部条件有关。 ②分裂期：外植体细胞经过诱导后脱