水稻二氢乳清酸脱氢酶基因克隆与表达的研究.pdfVIP

水稻二氢乳清酸脱氢酶基因的克隆与表达研究1 王妹梅，黄骥，张红生2 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室(210095) email:hszhang@ 摘 要：二氢乳清酸脱氢酶 （DHODH，dihydroorotate dehydrogenase, EC）催化嘧啶 从头合成途径中第四步反应，即二氢乳清酸氧化生成乳清酸。本研究利用电子克隆的策略和 RT-PCR 的方法克隆了水稻二氢乳清酸脱氢酶基因的全长 cDNA 序列,命名为 OsDHODH2 （Oryza sativa dihydroorotate dehydrogenase 2 ）。该cDNA 序列全长为 1632bp, 编码469 个氨 基酸，与拟南芥二氢乳清酸脱氢酶基因氨基酸序列的一致性和相似性分别为 81%和 89% 。 构建了OsDHODH2 的原核表达载体pET-30a(+)- OsDHODH2 ，转入大肠杆菌后得到了有效 表达并具有酶活性，证明OsDHODH2 是