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中国农业科学 2007, 40(6):1265-1270 Scientia Agricultura Sinica 猪中性粒细胞磷酸二酯酶基因表达及活性研究 1,2 2 1,2 1 3 3 4 姜代勋 ，陈 武 ，谷金妮 ，许剑琴 ，于同泉 ，路 苹 ，穆 祥 1 2 3 （中国农业大学动物医学院，北京 100094 ； 北京农学院动物科学技术系，北京 102206 ； 农业应用新技术北京市重点实验室，北京 102206 ； 4 兽医学（中医药）北京市重点实验室，北京 102206 ） 摘要：【目的】通过对猪中性粒细胞磷酸二酯酶（PDE）基因表达、活性及特异性抑制剂实验检测，研究其存 在的主要PDE 亚型及在体外的活性，为探讨PDE在中性粒细胞的分布、活性变化及对cAMP、cGMP 调节与中性粒细 胞功能关系提供依据。【方法】采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测PDE基因在猪中性粒细胞的表达，以高效 液相色谱（HPLC）检测环核苷酸在PDE反应前后的含量变化，计算PDE 活性。【结果】在检测的18个 PDE亚型中， PDE1B、2A、3A、3B、4A、4B、4C、4D、5A、7A、7B、8A、8B、9A、11A 共15个PDE mRNA在猪中性粒细胞表达， 特异性抑制剂实验表明PDE4、PDE5分别为水解cAMP、cGMP的主要PDE亚型；cAMP/cGMP-PDE在10～40 μl范围 内，与其活性存在良好的线性关系（r ＝0.9929/0.9992）。【结论】猪中性粒细胞至少存在 15 个 PDE 亚型，其中 PDE4、PDE5 为主要存在的 2 个亚型，PDE 样品量在一定范围内与其活性存在良好的线性关系，可作为筛选 PDE 型 中性粒细胞功能调节剂的方法。 关键词：中性粒细胞；磷酸二酯酶；中国实验用小型猪；高效液相色谱 Study on Activity and Gene Expression of Phosphodiesterase in Porcine Neutrophils 1,2 2 1,2 1 3 3 4 JIANG Dai-xun , CHEN Wu , GU Jin-ni , XU Jian-qin , YU Tong-quan , LU Ping , MU Xiang 1 2 ( College of Veterinary Medicine, China Agricultural University, Beijing 100094; Department of Animal Science and Technology, Beijing University of Agriculture, Beijing 102206 ; 3Key Laboratory of New Technology in Agriculture Application of Beijing Municipal, Beijing 102206 ; 4Beijing Key Laboratory of Veterinary Medicine (Traditional Chinese Medicine and Pharmacology),