胞内Ca~(2+)和小G-蛋白对人中性粒细胞胞吐调控作用.pdfVIP

生理学报 ActaPhysiologicaSinica,December25,2003,55(6):699一704 699 胞内Cat+和小G·蛋白对人中性粒细胞胞吐的调控作用 朱 莹’，汪俊汉2，吴健民3，徐 涛，，’，张春光，，‘ ，华中科技大学生命科学与技术学院，生物物理与生物化学研究所，武汉430074;2华中科技大学本都医院检验科， 武汉430074;’华中科技大学协和医院检验科，武汉430030 摘 要: 中性粒细胞在机体抵抗细菌感染中起着非常重要的作用:本研究应用全细胞膜片钳微电极灌流和膜电 容检测技术研究了细胞内钙及GTPyS对中性粒细胞胞吐的调控作用。结果表明，钙引起的细胞膜电容增加呈现两个 不同的分泌相。第一相发生在钙浓度为。.2一14pmoVL区间，膜电容增加幅度为1.23pF,钙的EC50值为」1 pmoVL。这部分膜电容增加可能对应于三级颗粒的释放。第二相发生在钙浓度为20一70pmoVL区间，膜电容噜加 幅度为6.36pF,钙的EC50值为33pmoVL这部分膜电容增加可能对应于一、二级颗粒的释放。细胞内Cap浓度 可同时影响细胞分泌的平均速率和最终可达到的分泌程度。而用GTPyS刺橄细胞分泌时，只要作用时间足够长( 20min),20-100pmoVL的GTPyS均可使中性粒细胞膜电容增加6pF以上oGTPyS的浓度不影响细胞膜电容的最 终可增加的幅度，但细胞分泌的平均速率随着GTPy5的浓度的增加而增加 关健词:中性粒细胞;胞吐;钙;小G一蛋白 中图分类号:娜15,8392 RolesofintracellularcalciumandmonomericG-proteinsinregulatingexo- cytosisofhumanneutrophils ZHUYing，WANGJun-Hon，WUJian-Min，XUTao*，MANGChun-Guang‘ InstituteofBiophysicsandBiochemistry,SchoolofLifeScienceandTechnology，HuazhongUniversityofSci- enceandTechnology,Wuhan430074;’MainCampusHospital,HuazhongUniversityofScienceandTechnoL ogy,Wuhan430074;UnionHospital,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan430030 Abstract; Neutrophilsplayamajorroleinhostdefenseagainstmicrobialinfection.Therearesome cluesindicatethatneutrophilsmayalsoplayaroleinthepathophysiologyoftheairwayobstructioninchron- icasthma.WestudiedtherolesofintracellularcalciumandGTPySintheregulationofneutrophilsexocyto- sisusingpipetteperfusionandmembranecapacitancemeasurementtechniqueinwholecellpatchclamp configuration.Theresultsshowedthatthemembranecapacitanceincreaseinducedbycalciumrevealeda biphasieprocess.Thefirstphaseoccuredwhenthecalciumlevelwasbetween0.2一14pmol/Lwithaplat-